[发明专利]一种鼠抗猴IgG种属特异性抗体及其应用和基于此的抗药抗体的通用型检测方法在审
| 申请号： | 202111309771.5 | 申请日： | 2021-11-03 |
| 公开（公告）号： | CN114044828A | 公开（公告）日： | 2022-02-15 |
| 发明（设计）人： | 邹灵龙;梁宇 | 申请（专利权）人： | 湖州中科湖兴生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/42 | 分类号： | C07K16/42;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京鹏帆慧博知识产权代理有限公司 11903 | 代理人： | 祝辽原 |
| 地址： | 313000 浙江省湖州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鼠抗猴 igg 种属 特异性 抗体 及其 应用 基于 抗药 通用型 检测 方法 | ||
1.一种鼠抗猴IgG种属特异性抗体，所述鼠抗猴IgG种属特异性抗体的制备方法包括以下步骤：
利用单抗药免疫食蟹猴，得到猴来源的抗药抗体；
利用猴来源的抗药抗体免疫小鼠，得到鼠抗猴抗体；
筛选鼠抗猴抗体得到鼠抗猴IgG种属特异性抗体。
2.权利要求1所述的鼠抗猴IgG种属特异性抗体在检测抗药抗体中的应用。
3.权利要求1所述的鼠抗猴IgG种属特异性抗体在制备抗药抗体的检测试剂盒中的应用。
4.一种猴抗人抗药抗体的通用型检测试剂盒，所述猴抗人抗药抗体的通用型检测试剂盒包括以下组分：权利要求1所述的鼠抗猴IgG种属特异性抗体、ADA阳性对照、抗体药物、磁珠和缓冲液；
所述ADA阳性对照包括食蟹猴来源的抗药抗体。
5.一种临床前猴抗人抗药抗体的通用型检测方法，所述通用型检测方法包括亲和素-生物素法和抗体法。
6.根据权利要求5所述的抗药抗体的通用型检测方法，其特征在于，所述亲和素-生物素法包括以下步骤：
(1)将标记有亲和素的磁珠与标记有生物素的单抗药混合，得到结合有单抗药的磁珠；
(2)将结合有单抗药的磁珠置于酶标板的板孔中，得到含有磁珠的酶标板；
(3)向含有磁珠的酶标板中添加样本，得到含有样本的酶标板；
(4)使用缓冲液对含有样本的酶标板进行吹吸混匀；
(5)所述吹吸混匀结束后，进行结合反应得到结合有鼠抗猴IgG种属特异性抗体的链霉亲和素磁珠复合物；
所述结合反应包括：将带有显色标记物的权利要求1所述的鼠抗猴IgG种属特异性抗体加入含有链霉亲和素磁珠与样本复合物的酶标板中并进行孵育处理；
(6)向结合有鼠抗猴IgG种属特异性抗体的磁珠复合物中加入显色底物进行显色反应，得到显色反应磁珠复合物；
(7)将磁板置于显色反应磁珠复合物所在的底部，将磁珠吸引到微孔边缘，再加入终止液；
(8)使用酶标仪进行检测，并与空白对照组进行对比得到检测结果。
7.根据权利要求6所述的抗药抗体的通用型检测方法，其特征在于，所述标记有亲和素的磁珠包括链霉亲和素磁珠。
8.根据权利要求5所述的抗药抗体的通用型检测方法，其特征在于，所述抗体法包括以下步骤：
(1)将标记有鼠抗人IgG的磁珠与单克隆抗体混合，得到结合有单克隆抗体的磁珠；
(2)将结合有单克隆抗体的磁珠置于酶标板的板孔中，得到含有磁珠的酶标板；
(3)向含有磁珠的酶标板中添加样本，得到含有样本的酶标板；
(4)使用缓冲液对含有样本的酶标板进行吹吸混匀；
(5)所述吹吸混匀结束后，进行结合反应得到结合有鼠抗猴IgG种属特异性抗体的磁珠复合物；
所述结合反应包括：将带有显色标记物的权利要求1所述的鼠抗猴IgG种属特异性抗体加入含有磁珠与样本复合物的酶标板中并进行孵育处理；
(6)向结合有鼠抗猴IgG种属特异性抗体的磁珠复合物中加入显色底物进行显色反应，得到显色反应磁珠复合物；
(7)将磁板置于显色反应磁珠复合物所在的底部，将磁珠吸引到微孔边缘，再加入终止液；
(8)使用酶标仪进行检测，并与空白对照组进行对比得到检测结果。
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