[发明专利]一种测定极低密度脂蛋白亚组份成分分布的方法

说明书

本发明公开了一种测定极低密度脂蛋白（VLDL）亚组份及其成分分布的方法，包括以下步骤：（1）根据VLDL的密度，将总VLDL划分为2‑5个亚组分，并测定每个亚组分中甘油三酯、胆固醇、游离胆固醇、磷脂的含量；（2）计算每个亚组分中甘油三酯与各个亚组分中总甘油三酯的比值，胆固醇、游离胆固醇、磷脂按照同样方法计算比值，得到VLDL的成分在每个亚组份中的分布情况；（3）根据个体时间/干预进程，进行多次测量，比较各成分分布的变化情况。在个体疾病或脂代谢异常时，总极低密度脂蛋白检测结果稳定的情况下，本发明方法能够根据甘油三酯、胆固醇、游离胆固醇、磷脂在亚组分中的分布变化规律，反映出个体脂代谢的变化状态。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地，涉及一种测定极低密度脂蛋白亚组份及其成分分布的方法。

背景技术

肝脏是脂肪代谢重要器官，极低密度脂蛋白（VLDL）是肝脏最为重要的脂代谢载体：极低密度脂蛋白，是由肝脏利用乳糜颗粒、残粒、胆汁酸、脂肪酸、糖和蛋白质的中间代谢物与肝脏内合成的载脂蛋白组成的一种脂蛋白。VLDL的主要功能是运输肝脏中合成的内源性甘油三酯。无论是血液运输到肝细胞的脂肪酸，或是糖代谢转变而形成的脂肪酸，在肝细胞中均可合成甘油三酯，最终由VLDL运送至肝外器官执行机体全身的脂类代谢，因而VLDL是肝脏参与脂代谢的最为重要的载体。

VLDL大小为30-80nm，含有甘油三酯、胆固醇、游离胆固醇、磷脂和蛋白成分（ApoB100为主），在总VLDL中甘油三酯（TG）约占60%，胆固醇（TC）约占20%，载脂蛋白约占10%，其他成份约10%，成分占比相对固定。

使用超速离心或核磁共振等方法可根据密度对总VLDL进行亚组份划分，将VLDL分为2-5个组分，并可通过测量得到每个亚组份中的成分含量（甘油三酯、胆固醇、游离胆固醇、磷脂），但测定结果无公认正常范围，个体波动大，无法得到有效应用。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种测定极低密度脂蛋白亚组份成分分布的方法，该方法针对血液样本中VLDL亚组份成分进行检测后，对亚组份及其各成分的占比进行计算，通过自身总VLDL检测值指标对个体化差异进行归一，可在多次检测中对个体的变化进行监控，变化趋势与基线进行对比，可反映个体的代谢及疾病状况。

技术方案：本发明提供一种测定极低密度脂蛋白亚组份成分分布的方法，包括以下步骤：

（1）根据VLDL密度，将总VLDL划分为2-5个亚组分，并测定每个亚组分中甘油三酯、胆固醇、游离胆固醇、磷脂的含量；

（2）计算每个亚组分中甘油三酯与各个亚组分中总甘油三酯的比值，胆固醇、游离胆固醇、磷脂按照同样方法计算比值，得到VLDL的成分在每个亚组份中的分布情况；

（3）根据个体时间/干预进程，进行多次测量，比较中各成分分布的变化情况。

作为优选：

步骤（1）中使用超速离心法对总VLDL进行亚组份划分（4个亚组分），然后采用比色法和比浊法测定每个亚组分中甘油三酯、胆固醇、游离胆固醇、磷脂的含量。

或者，使用核磁共振法进行检测，利用脂蛋白链-CH₃及-CH₂-信号群的积分对脂蛋白各亚类进行定量（划分为5个亚组分），并从检测指标中提取VLDL亚组分及各成分的定量信息。

所述方法能够根据甘油三酯、胆固醇、游离胆固醇、磷脂在亚组分中的分布变化规律，反映出个体脂代谢的变化状态。

步骤（3）中所述干预包括手术干预或者药物干预。

本发明使用空腹血液样本，离心去除血细胞，得到血清/血浆，将血清/血浆与缓冲液等量配比/超速离心分离后，转入检测管中等待检测，样本前处理步骤简单、试剂稳定性高，兼容性好，能够为后续检测提供稳定的检测信号样本环境。