[发明专利]一种基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗、制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗，其特征在于，使用环糊精接枝壳聚糖作为疫苗佐剂或疫苗载体，所述的环糊精接枝壳聚糖是通过环糊精以共价键合方式与壳聚糖连接。

2.根据权利要求1所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗，其特征在于，当所述使用环糊精接枝壳聚糖作为疫苗佐剂或疫苗载体时，抗原分子、免疫刺激剂或药物与所述环糊精接枝壳聚糖的疏水中心空腔通过自组装方式形成超分子结构。

3.根据权利要求1或2所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗，其特征在于，所述的环糊精接枝壳聚糖，其结构通式为：

其中，n为≥1的自然数。

4.根据权利要求1～3任一项所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗的制备方法，其特征在于，包含环糊精接枝壳聚糖的合成步骤、MUC1多肽化合物的固相合成步骤以及将所述的环糊精接枝壳聚糖与MUC1多肽化合物组装成纳米颗粒的步骤。

5.根据权利要求4所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗的制备方法，其特征在于，所述的环糊精接枝壳聚糖的合成步骤，包括：

将β-环糊精溶解于双蒸馏水中以获得悬浮液；然后缓慢添加对甲苯磺酰氯，并在室温下搅拌混合物；再将20％w/v的NaOH溶液添加入悬浮液，6小时后，通过过滤去除残余物；用稀盐酸将滤液的pH调节至7，并将溶液在4℃条件下保存以获得沉淀物；过滤沉淀物并进行再结晶，冷冻干燥，得到产物A，命名为β-CD-OTs；

将壳聚糖CS溶解于1％(v/v)乙酸中，得到壳聚糖溶液；将β-CD-OTs的N，N-二甲基甲酰胺溶液添加到壳聚糖溶液中，根据壳聚糖CS和β-CD-OTs的用量不同，获得不同接枝度的环糊精接枝壳聚糖混合物；

环糊精接枝壳聚糖混合物在100℃下回流反应24小时，再用去离子水透析3天；最后，将溶液冷冻干燥，得到环糊精接枝壳聚糖的棉状粉末。

6.根据权利要求4所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗的制备方法，其特征在于，所述的MUC1多肽化合物的固相合成步骤，包括：在固相树脂载体上将氨基酸从C端至N端依次连接，最后从固相载体上切割后得到MUC1多肽化合物。

7.根据权利要求4或6所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗的制备方法，其特征在于，所述的MUC1多肽化合物包括MUC1、ada-ACP-MUC1或ada-ACP-MUC1(Tn)。

8.根据权利要求7所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗的制备方法，其特征在于，所述的环糊精接枝壳聚糖与MUC1多肽化合物组装成纳米颗粒的步骤，包括：将环糊精接枝壳聚糖完全溶解在乙酸溶液中，然后用NaOH溶液调节其pH至4.5～6，分别加入MUC1、ada-ACP-MUC1或ada-ACP-MUC1(Tn)，室温搅拌，加入三聚磷酸钠溶液，室温搅拌后，用透析袋透析3d，分别得到CS-g-CD/MUC1纳米颗粒、

CS-g-CD/ada-ACP-MUC1纳米颗粒或CS-g-CD/ada-ACP-MUC1(Tn)纳米颗粒。

9.根据权利要求1所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗，其特征在于，所述环糊精为alpha、beta、gamma环糊精及其衍生物，优选为beta-环糊精及其衍生物。

10.根据权利要求2所述的基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗，其特征在于，所述抗原分子选自肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原、病毒抗原、细菌抗原、真菌抗原或寄生虫抗原。