[发明专利]一种血小板-DFO脂质体纳米颗粒、制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种血小板‑DFO脂质体纳米颗粒，其制备方法和应用。所述血小板‑DFO脂质体纳米颗粒为三层结构，中间层为脂质体，由大豆卵磷脂：胆固醇：mPEG‑DSPE‑2000按质量比(3‑4):2:1制备而成，用以包裹最内层铁螯合剂DFO，最外层包裹血小板膜，脂质体DFO与血小板的比例为1mL:1.0‑2.0×10⁹个血小板的膜。本发明的血小板‑DFO脂质体纳米颗粒理化性质稳定、分散均一，具备长期保存稳定性和缓控释能力，能够穿越血脑屏障，具有靶向血管损伤区域的能力。其作为治疗缺血溶栓后的一种药物进行应用，制备成静脉注射液、胶囊、口服液、滴丸、喷鼻剂等剂型，可用于治疗各种器官血管堵塞疏通后对周围组织造成损伤的治疗。

技术领域

本发明涉及一种血小板-DFO脂质体纳米颗粒，制备方法及其在靶向治疗脑缺血再灌注损伤的药物中的应用，属于生物工程技术领域。

背景技术

缺血性脑中风是一种由于脑部血管栓塞引起的神经系统疾病，因其高致残率、高复发率和高致死率成为全球范围内引起人类死亡的第二大病因。目前针对缺血性脑中风最有效的治疗方法是药物或机械溶栓。但溶栓后脑血流的瞬间恢复又会引起钙离子内流、炎症反应以及自由基积累，造成不可避免的、更为严重的二次损伤，即脑缺血再灌注损伤(Ischemic reperfusion, I/R)。由于难以透过血脑屏障(blood brain barrier, BBB)等原因，目前针对I/R损伤的药物还十分有限。因此，开发并制备能有效穿越BBB并靶向缺血损伤区的溶栓后治疗用药迫在眉睫。I/R损伤的病理机制较复杂，其中最重要的原因之一是大量活性氧自由基(Reactive oxygen species, ROS)在脑内过度积累,引起神经细胞的死亡，而脑铁过载是造成氧化应激损伤的关键因素。

铁是人体必不可少的微量元素，特别是脑作为高耗氧、高代谢活性的器官，有较高的铁含量。铁参与了脑内能量代谢、递质合成、突触构建、髓鞘形成等多种过程，是维持正常脑功能必不可少的成分。但是，脑铁过量时则会产生毒性作用。一方面铁可以通过芬顿反应促进自由基的形成；另一方面，铁可以作为酶的辅基催化脂质过氧化反应，促进脂质自由基的形成。随着研究的深入，越来越多的证据表明，铁依赖的ROS在缺血损伤区过量积累，使大量神经细胞发生铁死亡，是造成I/R脑内神经元丢失的重要原因。临床数据分析也发现，缺血性脑中风患者血清中铁蛋白含量与患者的损伤程度呈正相关。小鼠模型中，缺血损伤区的铁水平显著升高，且高铁饲养的小鼠在I/R损伤后表现出更严重的细胞死亡和运动功能障碍。因此，及时祛除I/R脑损伤区内过量的铁即可有效缓解脑损伤，改善治疗效果。

去铁胺(DFO)是一种临床上常用的铁螯合剂，与铁具有高亲和性，能治疗铁过载相关疾病，但由于其是亲水性药物，半衰期短，难以透过BBB，外周毒性大等特点，限制了其在治疗缺血性中风中的应用。如何将DFO有效递送至缺血损伤区抑制铁依赖的神经损伤，同时不影响正常脑区的铁水平成为临床上脑中风溶栓后治疗药物制备的重点与难点。因此，如何构建一种具有靶向性、高载药量、低毒、易穿越BBB的祛铁药物，用于有效治疗缺血性脑中风溶栓后，血流再灌注引起的二次神经损伤，成为亟需解决的课题。

发明内容

本发明的目的是提供一种血小板-DFO脂质体纳米颗粒，将DFO、大豆卵磷脂、胆固醇、mPEG-DSPE-2000和血小板按照一定比例制备而成，用于缺血性脑中风溶栓后神经损伤的治疗药物。