[发明专利]香柑内酯作为活性成分在制备抗胰腺癌药物中的应用

说明书

本发明公开了一种香柑内酯化合物的药物活性——抗胰腺癌活性，以期用于制备康胰腺癌的药物，属于植物有效成分分离领域和医药领域。本发明通过CCK‑8法、抑制CFPAC‑1细胞迁移、诱导CFPAC‑1细胞凋亡实验表明，从花椒中分离的香柑内酯类化合物ZB‑1具有很好的抗胰腺癌活性，可作为活性化合物，用于制备治疗胰腺癌的药物。

技术领域

本发明涉及一种香柑内酯化合物的药物活性——抗胰腺癌活性，以期用于制备康胰腺癌的药物，属于植物有效成分分离领域和医药领域。

背景技术

胰腺癌（PC）具有很高的侵袭性和致命性，是目前已知预后最差的恶性肿瘤之一。近年来，我国胰腺癌的发病率呈上升趋势，其死亡率居恶性肿瘤的前10位，5年生存率只有10%。胰腺癌患者中大约有80%-85%的患者无法手术切除或者已经发生转移，即使可以局部手术切除的患者，预后仍然很差，通过手术得到控制的患者只有10%~15%。药物治疗是胰腺癌治疗的主要手段之一，但由于耐药性和缺乏药物特异性，药物总体有效率不到20%。为了延长胰腺癌患者的生存期，迫切需要开发寻找更加安全有效的胰腺癌化疗药物。

天然产物作为药物的重要来源，在新药的发现和开发中发挥着重要的作用。60%以上的抗肿瘤药物与天然产物密切相关。因此，寻找天然活性化合物，发现新型抗胰腺癌药物，有助于推动寻找高效抗胰腺癌药物。香柑内酯，是从干燥成熟的花椒果中分离出来的天然甘松萜类化合物。其具体分离方法为：花椒干燥果皮用70%乙醇水溶液室温提取3次，每次7天；合并萃取液，减压除去溶剂，得到总萃取物；将总萃取物分散于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取，分别得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相；将得乙酸乙酯相减压浓缩，得到提取物；乙酸乙酯相萃取物通过硅胶柱色谱分离，石油醚/丙酮（20:1~ 0:1，v/v）梯度洗脱，共得到 15 种组分（Fr.1-Fr.15）。其中Fr.8经甲醇重结晶得白色粉末，经制备型薄层层析（二氯甲烷-乙酸乙酯，40:1）展开，得到的化合物即为香柑内酯，标记为ZB-1。该化合物通过文献谱图比对确定为香柑内酯(Choi et al., 2012)。Choi, J.Y., Kim,H.M., Lee, J.M., et al., 2012. Antibacterial activity of Zanthoxylumschinifolium. Nat. Prod. Sci. 18 (2), 137-140。结构如下：

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香柑内酯是一种重要的线型呋喃香豆素类化合物,是一种具有很强生物活性的天然产物，其对皮肤有光学活性，具有抗微生物活性和杀灭软体动物作用，临床上用于治疗银屑病。现代药理实验研究表明，香柑内酯对肿瘤、细胞增生也有一定的抑制活性，是一种潜在的抗肿瘤药物的中间体。然而，对于香柑内酯的抗胰腺癌活性尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种花椒中香柑内酯的抗胰腺癌活性，以期用于制备治疗抗胰腺癌的药物。

下面通过通过CCK-8法、抑制CFPAC-1细胞迁移、诱导CFPAC-1细胞凋亡实验，对于香柑内酯类化合物ZB-1的抗胰腺癌活性进行具体研究和分析。

、香柑内酯类化合物抑制胰腺癌细胞增殖活性

本实验用人源胰腺癌细胞CAPAN-2、CFPAC-1、PANC-1、SW1990细胞，取对数生长期的CAPAN-2、CFPAC-1、PANC-1、SW1990细胞，接种于96孔板（每孔1×10⁴个细胞），待细胞贴壁后，分别加入浓度范围为0.1-100 µM梯度的待测化合物，培养72 h，然后每孔加入10 µLCCK-8溶液继续培养4小时，振荡10 min，酶标仪450 nm测定吸光度值，采用CCK-8法检测花椒中香柑内酯类化合物ZB-1对胰腺癌细胞CAPAN-2、CFPAC-1、PANC-1、SW1990细胞的增殖抑制作用，根据OD值计算SW1990胰腺癌细胞的存活率，如图1。