[发明专利]一种与Ⅲ型烟草蔗糖酯基因qBMVSE471紧密连锁的共显性SSR分子标记及其应用

说明书

本发明公开了一种与Ⅲ型烟草蔗糖酯基因qBMVSE471紧密连锁的共显性SSR分子标记及其应用；与Ⅲ型烟草蔗糖酯基因qBMVSE471紧密连锁的共显性SSR分子标记的编号为TMc42726和TMt09661，其PCR扩增产物核苷酸序列分别由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示。与Ⅲ型烟草蔗糖酯基因qBMVSE471紧密连锁的共显性SSR分子标记在检测烟草基因组DNA中是否存在Ⅲ型烟草蔗糖酯基因qBMVSE471中的应用。本发明提供的与Ⅲ型烟草蔗糖酯基因qBMVSE471紧密连锁的共显性SSR分子标记具有精准、高效、稳定、便捷和低成本的特点，因此该分子标记可以作为烟草高香气品质育种中Ⅲ型蔗糖酯基因qBMVSE471分子标记辅助选择的应用。

技术领域

本发明涉及分子遗传育种技术领域，具体涉及一种与Ⅲ型烟草蔗糖酯基因qBMVSE471紧密连锁的共显性SSR分子标记及其应用。

背景技术

烟草蔗糖酯是其叶片表面化学主要成分之一，也是烟草中重要的潜在致香前体物质，其中，栽培烟草中含量较高的为蔗糖四酯(Severson R F,Arrendale R F,Chortyk OT,Quantitation ofthe major cuticular components from green leaf ofdifferenttobacco types.Journal ofAgricultural and Food Chemistry,1984,(32):566-570.)，其降解可产生小分子挥发性脂肪酸并可极大地提高烟叶的香气品质(Severson R F,Arrendale R F,Chortyk O T,Isolation and characterization ofthe sucrose estersofthe cuticular waxes ofgreen tobacco leaf.Journal ofAgricultural and FoodChemistry,1985,(33):870-875.Leffingwell J C,Chemical constituents of tobaccoleaf and differences among tobacco types.Social Science ElectronicPublishing,2001,1:38-44.)。大量研究表明，普通烟草中的蔗糖四酯依据分子量的大小不同，进一步分为6个类型(组)，即，I型烟草蔗糖酯～VI型烟草蔗糖酯，其中，III型～VI型烟草蔗糖酯中因含有3-甲基戊酰基而被称为BMVSE(Vontimitta V,Danehower D A,SteedeT,Moon H S,Lewis R S,Analysis of a Nicotiana tabacum L.genomic regioncontrolling two leafsurface chemistry traits.Journal ofAgricultural and FoodChemistry,2010,58:294-300.)。不同栽培烟草类型中蔗糖四酯的结构类型和含量存在较大差异，烤烟、白肋烟和马里兰烟中仅含少量的I型和II型烟草蔗糖酯，不含或含有痕量的BMVSE；而香料烟和雪茄烟含有大量的BMVSE(蔡莉莉，谢复炜，刘克建，张映，谢剑平，香料烟中蔗糖酯的气相色谱/质谱分析.烟草科技,2009,3:40-44.王瑞玲，王莹莹，毛多斌，贾春晓，烟草中蔗糖四酯类化合物的GC-MS分析.化学研究与应用,2011,23(8):1030-1035.屈亚芳，许明录，曹建敏，孙惠青，尤祥伟，王国平，蒋彩虹，王元英，常爱霞，不同基因型烟草腺毛主要分泌物差异分析.中国烟草学报,2018,24(1):45-52.陈彪，陈铭，李洋洋，屈亚芳，程立锐，杨爱国，胡日生，刘旦，罗成刚，向世鹏，冯全福，常爱霞，烟草糖酯SSR分子标记筛选及辅助育种应用.中国烟草科学,2019,40(3):8-15.)。BMVSE经硅烷化气相色谱质谱(GC-MS)进一步解析后，依据葡萄糖环部分特征碎片离子大小又可分为BMVSE471(III型烟草蔗糖酯)、BMVSE485(IV型烟草蔗糖酯)和BMVSE499(V型烟草蔗糖酯)，上述3种类型烟草蔗糖酯也是培育含高蔗糖酯而具有高香气品质烤烟新品种的核心关注点。