[发明专利]circ_RELB作为分子标记物在制备诊断糖尿病视网膜病变血管新生产品上的应用

说明书

本发明公开了circ_RELB作为分子标记物在制备诊断糖尿病视网膜病变血管新生产品上的应用，属于分子生物学领域。本发明通过研究circ_RELB对DR血管新生中的作用，circ_RELB/miR‑7‑5p/RELB在DR新生血管中的作用以及eIF4A3结合circ_RELB影响DR血管新生的作用，发现，可以将circ_RELB作为诊断糖尿病视网膜病变血管新生的分子标记物，为阻遏DR新生血管的临床应用提供新思路，具有重要的转化价值。

技术领域

本发明涉及circ_RELB作为分子标记物在制备诊断糖尿病视网膜病变血管新生产品上的应用，属于分子生物学领域。

背景技术

糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,DR)是糖尿病性微血管病变中最严重的并发症之一，已成为当前全球重要的致盲眼病。DR的发病主要是微血管病变，表现为视网膜微动脉瘤的形成，视网膜出血、渗出、视网膜新生血管形成、玻璃体积血及玻璃体视网膜增殖，最终可导致患者视功能不可逆的丧失。新生血管的产生是增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative Diabetic Retinopathy,PDR)的标志，也是影响视力预后的重要原因。临床上主要通过全视网膜光凝术(panretinal photocoa gulation,PRP)及眼部注射干预血管新生相关分子(靶点)药物达到缓解DR病程的作用，但尚缺乏有效控制DR发生发展的治疗方法。由于DR发病机制受多种基因和信号通路的调节，因此至今尚未完全阐明。已有研究表明，高血糖引起的基因调控失衡，导致视网膜微血管内皮细胞(Retinal microvascularendothelial cells，RMECs)功能障碍是诱导DR视网膜新生血管的产生的重要原因。因此，深入探讨高血糖环境诱导RMECs功能障碍的关键新分子(靶点)，将对有效控制DR新生血管的产生提供新的应用方向。

近年来环状RNA在人类疾病中对下游基因的调控已经得到极大的关注。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类被鉴定和分类的新的调控型非编码RNA，主要由外显子和(或)内含子构成，由前体mRNAs剪接形成的单链RNA，广泛表达于哺乳动物组织中并通过MRE(miRNA应答元件)作为microRNA(miRNA，另一类22nt左右的非编码RNA)的海绵(sponge)或者结合蛋白发挥功能，其中circRNA在血管新生中的发挥促进或者抑制作用的研究已有报导：如circRNA-MYLK吸附miR-29a调控VEGFA/VEGFR2信号通路和血管新生促进膀胱癌进展；在动脉粥样硬化中，circ_0003575参与氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管新生；在视网膜病变的研究中，circZNF609则通过吸附miR-615调控METRN表达发挥调控视网膜神经胶质细胞增殖的作用，另外circZNF609同样可吸附miR-615-5p并上调MEF2A的表达从而起到抑制血管形成的作用。因此，circRNAs可作为鉴定疾病机制和开发用于精确诊断和有效治疗DR的新方法的关键生物学标记。此外，环状RNA还可以充当RNA结合蛋白螯合剂或核转录调节剂来调节基因表达。研究表明CircRNA源自其母基因，可能与其母基因具有调节关系。

NF-κB(核因子激活的B细胞的κ-轻链增强)是一种蛋白质复合物，其控制转录的DNA，细胞因子产生和细胞存活。NF-κB几乎存在于所有动物细胞类型中，并参与细胞对刺激的反应，如应激，细胞因子等。有研究表明高糖环境可激活核因子κB(NF-κB)并促进细胞凋亡，它在糖尿病的血管并发症中起着重要作用。在糖尿病相关的血管并发症中，NF-κB明显增加，并且是其靶基因转录激活所必需的。在对非增殖性及增殖性糖尿病视网膜病变患者进行研究中发现，在增殖性糖尿病视网膜病变患者中NF-κB和VEGFA明显上调，这表明NF-κB参与糖尿病视网膜血管新生的病理过程。NF-kB家族有5个成员，包括NF-kB1(p50)、NF-kB2(p52)、RelA(p65)、RelB和c-Rel，通常所说的NF-kB蛋白，是指p65/p50亚单位形成的NF-KB1二聚体蛋白，以及RelB/p52亚单位形成NF-kB2二聚体蛋白。