[发明专利]基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶固相萃取柱

权利要求书

1.一种基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶固相萃取柱，其特征在于，通过以下步骤制备得到：

（1）将50~100mg 基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶与5~20mL甲醇，超声5~30min至分散均匀，移至聚丙烯材质的固相萃取小柱中，两端分别用筛板封堵；其中，基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶通过以下步骤制备得到：

(1.1) 将100mg氧化石墨烯、2.5g FeCl₃•6H₂O、20mL乙二醇、3.0g无水乙酸钠、10mL三乙烯四胺加入聚四氟乙烯厚壁耐压瓶中，用聚四氟乙烯螺旋塞密封，超声分散30min，随后转移至高压釜中于180℃反应16h，冷却至室温，磁分离，用超纯水洗涤数次至酸碱度呈中性，再用乙醇洗涤数次，80℃真空干燥24h，制得磁性纳米Fe₃O₄功能化氧化石墨烯纳米酶；

(1.2) 将1.0g步骤(1.1)制备的磁性纳米Fe₃O₄功能化氧化石墨烯纳米酶、0.2g 4-氨基苯硼酸与0.1g酚类化合物分子加入至40mL 0.05M PBS缓冲液中，超声分散10min至分散均匀，升温至100℃，回流反应24h；冷却至室温，磁分离，用超纯水洗涤数次至pH为7.0，再用甲醇超声洗涤数次至酚类化合物分子不被检出，60℃真空干燥24小时，制得兼具高选择性与强过氧化物酶活性的基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶；

（2）将100~500mg固相萃取吸附剂与5~20mL甲醇混合，超声5~30min至分散均匀，移至步骤1的固相萃取小柱中，顶端用筛板封堵，然后用5~20mL甲醇上柱清洗；

（3）将步骤2的固相萃取小柱用惰性气体吹扫，除去残留的有机溶剂，然后30~90℃真空干燥1~24小时，制得基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶固相萃取柱。

2.根据权利要求1所述基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶固相萃取柱，其特征在于，所述步骤（2）中，所述固相萃取吸附剂是C₁₈、改性二氧化硅、PSA中的一种或多种按任意比例混合组成。

3.根据权利要求2所述基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶固相萃取柱，其特征在于，所述固相萃取吸附剂是改性二氧化硅。

4.根据权利要求1所述基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶固相萃取柱，其特征在于，所述步骤（2）中，所述基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶与固相萃取吸附剂的质量比为1:1~1:10。

5.根据权利要求1所述基于氨基苯硼酸的酚类化合物分子印迹纳米酶固相萃取柱，其特征在于，所述酚类化合物分子为苯酚、2,4-二氯酚、间甲基苯酚、2,4,6-三氯酚、五氯酚与4-硝基苯酚中的一种或多种按任意比例混合组成。