[发明专利]利用海洋拟诺卡氏菌NA01583生产隆纳霉素的培养基及其发酵生产隆纳霉素的方法

权利要求书

1.一种利用海洋拟诺卡氏菌NA01583生产隆纳霉素的发酵培养基，其特征在于，每升发酵培养基包括如下组分：

葡萄糖20-30g/L、蛋白胨0.49-3.01g/L、酵母粉5.0-7.5g/L、黄豆粉0.95-11.05g/L、氯化钠0.97-6.02g/L、碳酸钙2-3g/L，pH值6～8，采用去离子水配制培养基。

2.如权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于，每升发酵培养基包括如下组分：葡萄糖20g/L、蛋白胨3g/L、酵母粉5g/L、黄豆粉11g/L、氯化钠1.6g/L、碳酸钙2g/L，pH值7.0。

3.一种使用权利要求1或2所述的发酵培养基发酵生产隆纳霉素的发酵方法，其特征在于，其是将拟诺卡氏菌NA01583种子液接种于权利要求1或2所述的发酵培养基中进行发酵，获得隆纳霉素。

4.如权利要求3的所述的发酵方法，其特征在于，发酵培养条件为：装液量10-20％；初始pH值6-7；接种量0.5-5％；种龄24-48h；培养温度28-32℃。

5.如权利要求4的所述的发酵方法，其特征在于，所述发酵培养条件为：装液量10％；初始pH值7.0；接种量1％；种龄24h；培养温度28℃。

6.如权利要求3-5任一项所述的发酵方法，其特征在于，拟诺卡氏菌NA01583种子液的制备步骤包括：

步骤一、将拟诺卡氏菌NA01583接种到ISP2固体培养基上活化，于28℃条件下培养4d；

步骤二、将1×1cm²琼脂块接种于0级种子培养基中，于28℃，200r/min摇床培养24h；

步骤三、取1OD培养24h的0级种子液接种于1级种子培养基中，于28℃，200r/min摇床培养24h，制备获得拟诺卡氏菌NA01583种子液。

7.一种使用如权利要求1或2所述的发酵培养基大规模发酵生产隆纳霉素的发酵方法，其特征在于，其是将拟诺卡氏菌NA01583种子液接种于权利要求1或2所述的发酵培养基中，然后在5L生物反应器中进行规模化发酵，获得隆纳霉素。

8.如权利要求7所述的发酵方法，其特征在于，规模化发酵的培养条件包括：装液量60％；初始pH值7.0；接种量1％；通气量1vvm；温度28℃；罐压0.03MPa；消泡剂添加量0.1％；溶氧≥30％，转速偶联；转速≥200r/m，溶氧偶联。

9.如权利要求8所述的发酵方法，其特征在于，规模化发酵的培养条件还包括：在进行规模化发酵前，先将葡萄糖单独灭菌条件为121℃灭菌20min，以及将发酵罐体灭菌条件为121℃灭菌40min，备用。

10.如权利要求7-9任一项所述的发酵方法，其特征在于，规模化发酵的种子液的制备过程如下：

步骤一、将拟诺卡氏菌NA01583接种到ISP2固体培养基上活化，于28℃条件下培养4d；

步骤二、将1×1cm²琼脂块接种于0级种子培养基中，于28℃，200r/min摇床培养24h；

步骤三、取1OD培养24h的0级种子液接种于1级种子培养基中，于28℃，200r/min摇床培养24h，制备获得拟诺卡氏菌NA01583种子液。