[发明专利]自然杀伤细胞及其用途

权利要求书

1.分离的自然杀伤(NK)祖细胞群体，其中所述NK祖细胞按照以下方法产生：(i)在包含Flt3L、TPO、SCF、IL-7、G-CSF、IL-6和GM-CSF的第一培养基中培养造血干细胞或祖细胞，(ii)随后在包含Flt3L、SCF、IL-15和IL-7、IL-17和IL-15、G-CSF、IL-6和GM-CSF的第二培养基中培养所述细胞，和(iii)随后在包含SCF、IL-15、IL-7、IL-2、G-CSF、IL-6和GM-CSF的第三培养基中培养所述细胞。

2.权利要求1的分离的NK祖细胞群体，其中培养步骤(i)的持续时间为7-9天，其中培养步骤(ii)的持续时间为5-7天，和其中培养步骤(iii)的持续时间为5-9天。

3.权利要求1的分离的NK祖细胞群体，其中培养步骤(i)的持续时间为7-9天，其中培养步骤(ii)的持续时间为5-7天，和其中培养步骤(iii)的持续时间为21-35天。

4.权利要求1、2或3的分离的NK祖细胞群体，其中所述方法中使用的造血干细胞或祖细胞是CD34⁺。

5.权利要求1、2或3的分离的NK祖细胞群体，其中所述造血干细胞或祖细胞包括来自人胎盘灌洗液的造血干细胞或祖细胞和来自脐带血的造血干细胞或祖细胞，其中所述胎盘灌洗液和所述脐带血是来自同一胎盘。

6.权利要求1-5中任一项的分离的NK祖细胞群体，其中在步骤(i)结束时，CD34-细胞占总群体的超过80％。

7.权利要求1-6中任一项的分离的NK祖细胞群体，其中所述群体包含不超过40％的CD3–CD56+细胞。

8.权利要求1-7中任一项的分离的NK祖细胞群体，其中所述群体包含CD52+CD117+细胞。

9.分离的自然杀伤(NK)祖细胞群体，其中所述群体包含不超过40％的CD3–CD56+细胞。

10.分离的自然杀伤(NK)祖细胞群体，其中所述群体包含CD52+CD117+细胞。

11.药物组合物，包含权利要求1-10中任一项的分离的NK祖细胞群体。

12.抑制肿瘤细胞增殖的方法，包括使所述肿瘤细胞与权利要求1-10中任一项的分离的NK祖细胞群体或权利要求11的组合物接近。

13.权利要求12的方法，其中，所述肿瘤细胞是原发性导管癌细胞、成胶质细胞瘤细胞、白血病细胞、急性T细胞白血病细胞、慢性髓样淋巴瘤(CML)细胞、急性髓细胞白血病细胞、慢性髓细胞白血病(CML)细胞、肺癌细胞、结肠腺癌细胞、组织细胞性淋巴瘤细胞、多发性骨髓瘤细胞、结肠直肠癌细胞、结肠直肠腺癌细胞、前列腺癌细胞或视网膜母细胞瘤细胞。

14.治疗有其需要的对象的造血系统癌症的方法，包括向所述对象给予权利要求1-10中任一项的分离的NK祖细胞群体或权利要求11的组合物。

15.权利要求14的方法，其中所述造血系统癌症是急性髓样白血病。