[发明专利]一种乌蔹莓总黄酮的制备方法

说明书

本发明提供了一种乌蔹莓总黄酮的制备方法，涉及分离纯化技术领域，该制备方法包括以下步骤：(1)乌蔹莓药材的预处理：将乌蔹莓药材洗净、干燥，粉碎、过筛后得到乌蔹莓药材饮片，备用；(2)乌蔹莓浓缩液的制备：干燥乌蔹莓药材饮片，乙醇回流提取，减压浓缩，离心后取上清液，即得乌蔹莓浓缩液；(3)装柱、上样：将AB‑8大孔吸附树脂预处理后装柱，将乌蔹莓浓缩液调节pH后，上样，动态吸附；(4)除杂、洗脱：将吸附柱进行水洗后再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压干燥，即得乌蔹莓总黄酮提取物。通过制备方法中各参数的优化，能够有效提高乌蔹莓黄酮的含量。

技术领域

本发明涉及分离纯化技术领域，具体涉及一种乌蔹莓总黄酮的制备方法。

背景技术

乌蔹莓为葡萄科乌蔹莓属植物乌蔹莓Cayratia japonica(Thunb.)Gagnep.的全草，具有清热利湿，解毒消肿之功效，主治热毒痈肿，疔疮，丹毒，风湿痹痛，黄疸等。乌蔹莓膏是南京市中医院著名制剂，已应用于临床30余年，临床表明其对肛周脓肿、乳痈、腮腺炎、痛风性关节炎、风湿性关节炎和腰痛等症均有良好的疗效。

目前多篇文献对乌蔹莓的提取工艺展开了研究，例如，文献：赵学龙等，乌蔹莓药学与临床研究现状及分析.中医药导报，2018(02):第110-113页.通过UPLC-QTOF-MS分析乌蔹莓成分表明主要是黄酮类成分，采用UPLC法对4个主要成分(木犀草素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素、芹菜素)建立了含量测定方法。文献：许倩倩等，UPLC-QTOF-MS分析乌蔹莓成分及多组分定量研究.南京中医药大学学报，2020.36(04):第517-524页.目前对乌蔹莓的提取工艺有所研究。文献：许倩倩等，响应面法优化乌蔹莓的提取工艺.药学与临床研究，2019.27(04):第257-260页.以干浸膏得率和木犀草素含量作为评价指标，通过响应面法优化乌蔹莓软膏原料的最佳醇提工艺，最佳工艺修正为：加醇量12倍，提取时间2.5h，乙醇浓度70％。文献：江念等，正交试验法优化3种乌蔹莓属植物中黄酮和多糖的水提醇沉工艺.中成药，2016(10):第2281-2284页.采用正交试验法优化乌蔹莓、华中乌蔹莓和鸟足乌蔹莓中黄酮和多糖的水提醇沉工艺。但目前为止，文献多对乌蔹莓含量及提取工艺进行了研究，很少有制备乌蔹莓总黄酮提取物的方法报道，且乌蔹莓的提取或纯化工艺所得到的乌蔹莓总黄酮的纯度整体偏低。

针对乌蔹莓总黄酮提取纯化纯度低的问题，寻找一种乌蔹莓总黄酮纯度较高的制备工艺十分关键。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种乌蔹莓总黄酮的制备方法，通过各参数的优化，能够有效提高乌蔹莓黄酮的含量。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供了一种乌蔹莓总黄酮的制备方法，包括以下步骤：

(1)乌蔹莓药材的预处理：将乌蔹莓药材洗净、干燥，粉碎、过筛后得到乌蔹莓药材饮片，备用；

(2)乌蔹莓浓缩液的制备：干燥乌蔹莓药材饮片，乙醇回流提取，减压浓缩，离心后取上清液，即得乌蔹莓浓缩液；

(3)装柱、上样：将AB-8大孔吸附树脂预处理后装柱，将乌蔹莓浓缩液调节pH后，上样，动态吸附；

(4)除杂、洗脱：将吸附柱进行水洗后再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压干燥，即得乌蔹莓总黄酮提取物。

进一步地，步骤(1)中所述过筛的筛网为80-120目。

进一步地，步骤(2)中所述回流提取具体为加12倍量体积分数为70％的乙醇回流提取两次，每次2.5h，过滤并合并滤液；所述减压浓缩具体指浓缩至生药1g/mL；所述离心具体指4000r/min低速离心20min。

进一步地，步骤(3)中所述预处理具体指使用体积分数为95％的乙醇预处理24h。