[发明专利]His-tag标签蛋白浓度的检测方法

权利要求书

1.一种His-tag标签蛋白浓度的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：制备固化蛋白溶液；制备浓度标准曲线，并将待测样品制备成样品溶液；利用ProteinA传感器捕获固化蛋白溶液中的固化蛋白，之后利用固化有所述固化蛋白的ProteinA传感器捕获样品溶液内的His-tag标签蛋白并进行检测，将检测结果代入所述浓度标准曲线中，得到待测样品中的His-tag标签蛋白浓度。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述浓度标准曲线的制备包括如下步骤：用稀释液将固化蛋白稀释到浓度为5μg/mL～20μg/mL；利用ProteinA传感器捕获不同浓度的固化蛋白溶液中的固化蛋白，根据固化蛋白的固化高度选择合适的固化蛋白的浓度；在所述合适的固化蛋白的浓度下，将标准品进行系列稀释，并利用固化有固化蛋白的ProteinA传感器捕获标准品中的标签蛋白并进行检测，根据检测结果建立浓度-结合速率的标准曲线。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，稀释后的所述标准品浓度范围为0.3906μg/mL～50μg/mL。

4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述合适的固化蛋白的浓度为10～15μg/mL。

5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，固化蛋白的固化高度为≥1.0nm。

6.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括传感器的再生步骤：将检测了样品的传感器先经过甘氨酸浸洗再生5～10s，再用稀释液进行复性操作5～10s，再生和复性操作各进行多次。

7.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括传感器的保存步骤：实验完全结束后，将ProteinA传感器在蔗糖溶液中浸泡至少30s，之后烘干并室温密封保存。

8.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述固化蛋白为抗His-tag抗体固化蛋白，包括Anti-His Tag Rabbit pAb和/或Anti-6His Tag antibody。

9.根据权利要求1～8任意一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测为利用生物分子相互作用分析系统进行检测。

10.根据权利要求2～8任意一项所述的检测方法，其特征在于，所述稀释液为含0～0.02％Tween20和0～0.1％BSA的PBS溶液。