[发明专利]一种普拉特链霉菌及其发酵产假尿苷和1-甲基-假尿苷的方法

说明书

本发明公开了一种普拉特链霉菌(Streptomyces platensis)DHE020，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.23602，保藏日期为2021年10月14日。所述普拉特链霉菌可同时发酵产假尿苷和1‑甲基‑假尿苷，具有工业化生产潜力。

技术领域

本发明涉及工业微生物发酵技术领域，具体涉及一种普拉特链霉菌及其发酵产假尿苷和1-甲基-假尿苷的方法。

背景技术

mRNA疫苗作为一种新型疫苗率先被英国和美国批在预防准用于预防新冠肺炎(COVID-19)，为阻止新冠肺炎(COVID-19)的传播起到了十分重要的作用。

相对传统疫苗而言，mRNA体外转录效率高，能快速、规模化生产，适用于流感病毒、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)等高变异性病毒疫苗的研发。另外，基因工程技术的发展使得mRNA更加适用于个性化医疗。但是，由于mRNA疫苗自身的稳定性差、易被组织内的核酸酶降解、进入细胞的效率较低、翻译效率较低等问题，这些缺陷限制了mRNA疫苗的应用。针对mRNA存在的以上问题，在提高mRNA疫苗稳定性和降低免疫刺激方面， mRNA中核苷酸类似物的修饰在一定程度上阻止了内源性mRNA的免疫监测，使细胞能够区分内源性mRNA与病理性或入侵性mRNA。这为mRNA疫苗的开发提供了新的思路，即通过合并修饰核苷来降低免疫刺激的产生，因此也提高了安全性。进一步的，作为化学修饰核苷酸的一种，即假尿苷以及进一步甲基化修饰的1-甲基-假尿苷为 mRNA中较为重要的结构性修饰核苷酸，在增加mRNA稳定性的同时，也极大的降低了免疫原性，从而降低免疫刺激，实现mRNA疫苗在体内的高效表达。由此可知，假尿苷和1-甲基-假尿苷为mRNA 疫苗中非常重要的一种结构性原辅料，在mRNA的生产以及发挥功能方面均具有不可或缺的重要意义。

而在假尿苷以及1-甲基-假尿苷制备方面，(1)假尿苷的合成技术难度大，存在化学合成步骤长，反应过程易燃易爆，综合收率低，且全球范围内尚未有公司可以开展假尿苷的大规模工业化生产；(2) 1-甲基-假尿苷，作为mRNA中的结构性核苷酸，是以假尿苷为起始物料进行甲基化修饰而得来，其制备难度更高，对其质量标准要求也更高。在生物合成方面，尚未发现可专一大量用于假尿苷和1-甲基- 假尿苷同时制备的微生物菌种和技术报道。因此，假尿苷和1-甲基- 假尿苷的低成本便捷式获取存在一定的缺陷。

针对现有技术中假尿苷和其甲基化产物1-甲基-假尿苷只能通过化学合成法制备，且化学合成过程中存在的合成步骤长、收率低，且用到的试剂易燃易爆，较不安全等一系列的问题，在此，本发明寻求一种新的微生物，并可通过简单的发酵和较低的成本实现假尿苷和 1-甲基-假尿苷的生产。

发明内容

考虑到mRNA疫苗广阔的应用前景，而假尿苷和1-甲基-假尿苷作为mRNA疫苗中至关重要的原辅料，为了解决假尿苷和1-甲基-假尿苷现有制备方法不足的问题，为了保证mRNA疫苗的稳定性生产和供应，本发明的目的之一在于提供一种新的发酵菌种，该菌为普拉特链霉菌(Streptomycesplatensis)DHE020，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.23602，保藏日期为2021年10月14日。

本发明的目的还在于提供了一种普拉特链霉菌 (Streptomycesplatensis)DHE020(CGMCC NO.23602)在制备假尿苷和1-甲基-假尿苷或者含有假尿苷和1-甲基-假尿苷的药物组合物的应用。

本发明还提供了一种假尿苷和1-甲基-假尿苷的制备方法，该方法包括采用普拉特链霉菌(Streptomycesplatensis)DHE020(CGMCC NO.23602)在含有可同化的碳源和/或氮源的营养培养基里，进行有氧发酵的步骤。