[发明专利]转移式高通量超薄切片染色仪在审
申请号: | 202111386363.X | 申请日: | 2021-11-22 |
公开(公告)号: | CN113970471A | 公开(公告)日: | 2022-01-25 |
发明(设计)人: | 梁静南;色日格楞;罗元明;李春立;樊峥;赵彤;孙树涛;王前;张晓兰 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | G01N1/31 | 分类号: | G01N1/31;G01N23/04;G01N23/20008;G01N23/20058;G01N35/00 |
代理公司: | 北京大田律师事务所 11941 | 代理人: | 姜义民 |
地址: | 100029 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转移 通量 超薄 切片 染色 | ||
本发明属于透射电镜技术领域。本发明提供了一种转移式高通量超薄切片染色仪,包括:支撑平台;支撑柱,所述支撑柱在支撑平台中心位置并固定在支撑平台上;瓶盖平台,所述瓶盖平台的中心位置固定在支撑柱的另一端;漂洗池、染色瓶A和染色瓶B,所述漂洗池、染色瓶A和染色瓶B都固定在支撑平台上并在支撑柱周围。本发明的装置能对载网架上插放的批量载网进行染液染色、漂洗、风干、再染液染色、漂洗、风干的自动化操作,提高工作效率,节约染液。
技术领域
本发明属于透射电镜技术领域。
背景技术
利用透射电镜观察生物样品细胞内部超微结构时,需要利用超薄切片制样技术,将样品制成100nm厚度以内的超薄切片,并承载在一个直径约3mm、内径约为2.6nm、环宽约为0.2mm、厚度为0.02mm的载网上,而后利用镊子尽可能夹取载网的环宽位置(最大程度避免对生物切片的机械损伤),进行染色的操作后,方能进行显微成像观察。该染色环节需要前后两种染液的染色,每种染液染色完成后,均需要漂洗和风干的环节,总共6步操作。
如何解决复杂手工染色问题,一直是载网染色技术的难点和痛点。
发明内容
有鉴于此,本发明提供的染色仪以发明专利ZL 201610366342.4和实用新型ZL202020027034.0两种对称夹持型批量载网架为核心功能部件,在此基础上搭建了机械转移的工作模式,完成对载网架上插放的批量载网进行染液染色、漂洗、风干、再染液染色、漂洗、风干的自动化操作。
本发明提供了一种转移式高通量超薄切片染色仪,包括:支撑平台;支撑柱,所述支撑柱在支撑平台中心位置并固定在支撑平台上;瓶盖平台,所述瓶盖平台的中心位置固定在支撑柱的另一端;漂洗池、染色瓶A和染色瓶B,所述漂洗池、染色瓶A和染色瓶B都固定在支撑平台上并在支撑柱周围。
在本发明的具体实施方式中,所述瓶盖平台上有三个工位,其中第一工位为中空孔位,第二工位和第三工位与染液瓶A和B的瓶盖的大小和尺寸相匹配。
在本发明的具体实施方式中,所述漂洗池包括:漂洗液腔室A、漂洗液进液管接口、连接壁、漂洗液腔室B、废液出口;所述漂洗液腔室A的一侧有漂洗液进液管接口,另一侧通过连接壁与漂洗液腔室B相连;所述漂洗液腔室B底部有废液出口;所述连接壁有若干孔径细小的孔洞或者狭缝,从漂洗液腔室A引入的液体接近平行方向通过连接壁进入漂洗液腔室B,达到漂洗液以近乎与载网架载网垂直的方向对其进行漂洗;所述废液出口与废液池相同并实现废液流入废液池。
在本发明的具体实施方式中,还包括废液池,所述废液池在支撑平台下方,用于接收漂洗池废液出口流出的液体。
在本发明的具体实施方式中,还包括:机械手和3个步进电机;所述机械手和3个步进电机设置在支撑平台上方,有3个步进电机控制控制机械手在X、Y、Z三个方向的移动,进而实现机械手对物品的抓取和运动;所述机械手用来抓取和抓放染液瓶A和染液瓶B的瓶盖,并实现盖盖和拔盖的操作;所述机械手还可以对已装卡上的载网架的功能部件的顶盖的抓取和抓放的动作;所述步进电机设置在龙骨架上。
在本发明的具体实施方式中,所述风干系统,所述风干系统包括四角和顶端风扇。
本发明还提供了一种转移式高通量超薄切片染色仪的染色方法,包括如下步骤:机械手抓取染液瓶A上的瓶盖A’离开染液瓶;机械手抓取功能部件S进入染液A中;染色后机械手携功能部件S从染液A中移动到漂洗池中漂洗中;机械手携功能部件S从漂洗池中移出并放回瓶盖台原位;将载网架上的切片进行风干;机械手抓取功能部件S,携功能部件S从瓶盖台中移出并移动到染液瓶B中;染色后机械手携功能部件S从染液B中移动到漂洗池中漂洗;机械手携功能部件S从漂洗池中移出并放回瓶盖台原位;将载网架上的切片进行风干。
在本发明的具体实施方式中,所述漂洗池中漂洗的步骤包括:漂洗液从输液管中先进入漂洗池腔室A中,而后从漂洗液腔室A和漂洗液腔室B的连接壁的若干空隙中以近乎水平方式喷流到漂洗液腔室B中实现漂洗。
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