[发明专利]一种高产喷司他丁和2’-氨基-2’-脱氧腺苷的野野村菌及其应用

说明书

本发明提供了一种野野村菌，属于微生物技术领域，野野村菌命名为(Nonomuraea sp.)MM‑46，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18780。该野野村菌能够同时发酵得到喷司他丁和2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷，本发明通过发酵得到的喷司他丁和2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷产量显著提高，发酵工艺简单、成本低，对工业化合成喷司他丁和/或2’‑氨基‑2’‑脱氧腺苷具有重要的意义，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种高产喷司他丁和2’-氨基-2’-脱氧腺苷的野野村菌及其应用。

背景技术

2’-氨基-2’-脱氧腺苷是一种对支原体有特殊活性的腺苷类似物，最早由Matsuyama K等人(Matsuyama et al.，1979)在筛选抗支原体活性的抗生素时，从一株放线菌Actinomadura sp.SA-4427的发酵液中分离得到。研究证明，它除了具有抗支原体活性外，还是RNA病毒复制的强有效抑制剂，可用于治疗麻疹病毒感染引起的疾病，同时2’-氨基-2’-脱氧腺苷还是一种应用非常广泛的医药中间体。

喷司他丁是白血病和肿瘤等疾病治疗的一线用药，已经成为近几年治疗白血病研究领域的一大热点。喷司他丁是由野野村菌Nonomuraea sp.ATCC 39365所产生的一种嘌呤类的抗代谢药物，作为腺苷脱氨酶强抑制剂，其通过抑制腺苷脱氨酶的活性，促进癌变细胞中脱氧腺苷的积累，导致核酸合成受阻，从而起到治疗作用。从分子结构看，喷司他丁是腺苷的结构类似物，不同点在于嘌呤六元环中，插入一个一碳单位的扩环结构(1,3-二氮杂卓环结构)，由于这种独特的化学结构使得喷司他丁在天然产物中具有特殊的生物活性。1991年，美国食品药品监督管理局(FDA)批准喷司他丁作为注射剂上市，药品名为Nipent，在临床上主要治疗急性T细胞淋巴细胞白血病、毛细胞白血病及慢性淋巴细胞白血病。

目前国际上关于喷司他丁、2’-氨基-2’-脱氧腺苷的研究仍处在起步阶段。野生型野野村菌Nonomuraea sp.ATCC 39365中喷司他丁和2’-氨基-2’-脱氧腺苷产量极低，且其生物合成的调控机制并不清楚，因此如何提高其发酵产量是亟待解决的一大难题。化学合成喷司他丁或2’-氨基-2’-脱氧腺苷的反应条件苛刻、原料价格昂贵，加之化学合成法路线繁杂，反应过程中常用到强酸、强碱、有机溶剂，对中间产物需要多次提纯，导致成本较高，收率较低，难以实现工业化生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高产喷司他丁和2’-氨基-2’-脱氧腺苷的野野村菌及其应用，该野野村菌能够显著提高喷司他丁和/或2’-氨基-2’-脱氧腺苷的产量。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种高产喷司他丁和2’-氨基-2’-脱氧腺苷的野野村菌，所述野野村菌命名为(Nonomuraea sp.)MM-46，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18780。

本发明还提供了上述野野村菌发酵得到的发酵液。

优选地，所述发酵液的制备方法包括如下步骤：将野野村菌接种到发酵培养基中培养即得。

优选地，所述发酵培养的温度为30～34℃，培养时间为5～7天。

优选地，所述发酵培养的温度为32℃，培养时间为6天。

优选地，所述发酵培养基由如下浓度的组分组成：麦芽浸粉25～35g/L，酵母浸粉7～17g/L，麦芽糖醇2～6g/L。

优选地，所述发酵培养基由如下浓度的组分组成：麦芽浸粉30g/L，酵母浸粉12g/L，麦芽糖醇4g/L。

优选地，所述发酵培养基的pH为7.6～8.0。