[发明专利]一种抗大田软海绵酸单链抗体的氨基酸序列及其表达载体

说明书

本发明具体涉及了一条抗大田软海绵酸的单链抗体的氨基酸序列及其表达载体。所述氨基酸序列包括：一重链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.1所示；一轻链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.2所示。编码该重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，编码该轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。所述单链抗体的核苷酸序列与带有组氨酸标签麦芽糖结合蛋白的pET28a‑MBP‑T7‑6×His表达载体形成了可溶性重组质粒。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗大田软海绵酸单链抗体的氨基酸序列及其表达载体。

背景技术

大田软海绵酸（Okadaic acid, OA）是一种聚醚类海洋生物毒素，其具有一定的生物毒性，由赤潮藻类产生，是一种海洋腹泻型贝类毒素。OA不具有紫外吸收，稳定性较好，对于一般加热处理方法很难将其毒性破坏。据统计，每年赤潮毒素产生的贝类毒素中毒事件累计高达300多起。2019年在对中国渤海贝类抽样检测报告中显示，23%的贝类均测出了含有OA毒素，其中毛蚶中居多，且OA已经被证实是肿瘤促进剂，严重威胁到了人类的身体健康，因此对OA毒素检测技术的开发及完善十分重要。

免疫学检测方法具有操作简便、快速、检测成本低、通量高、对技术人员的要求低的优点，适合于现场检测。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测OA，需要抗OA的抗体。以抗原免疫动物获得多抗血清是制备抗体的经典方法，但制备周期长，得到的抗体量有限。B淋巴细胞杂交瘤技术获得单克隆抗体，其特异性强，性质均一，但不易于大批量生产，特别是抗体制备中进行人为干预改进难以进行。通过基因工程技术，采用抗体分子基因重组可获得多种多样的特异性抗体，使抗体研制有了重要进展。基因工程抗体单链抗体（Singechain variable fragment, ScFv）具有低或无免疫原性、分子量小、组织穿透力强、成本低、可大规模生产等特点，经由重叠延伸PCR手段拼接成完整的scFv基因，在宿主细胞中表达获得可溶性抗体。重组单链抗体（scFv）能够保留与亲本单克隆抗体（mcAb）结构相一致的高特异性抗原识别位点。与传统的单克隆抗体相比，scFv具有重要的优势，其可操作性强，可根据研究目的进行改造，结合体外表达技术，为筛选获得高灵敏性重组抗体提供了简便而高效的操作系统。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗大田软海绵酸单链抗体的氨基酸序列及其表达载体。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种抗大田软海绵酸单链抗体的氨基酸序列，所述氨基酸序列包括：

一重链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.1所示；

一轻链可变区的氨基酸序列，其如SEQ ID No.2 所示。

一种编码上述的氨基酸序列的核苷酸序列，所述核苷酸序列包括：

一编码重链可变区的核苷酸序列，其如SEQ ID No.3所示；

一编码轻链可变区的核苷酸序列，其如SEQ ID No.4所示。

一种含有上述核苷酸序列，且以带有可溶性组氨酸标签麦芽糖结合蛋白的pET28a-MBP-T7-6×His表达载体为初始载体的重组质粒。