[发明专利]双氢青蒿素在抗肿瘤药物的制备中的应用

说明书

本发明公开了一种双氢青蒿素在抗肿瘤药物的制备中的应用，所述抗肿瘤药物包含活性成分，所述的活性成分由双氢青蒿素和奥沙利铂组成。通过双氢青蒿素和奥沙利铂的联用，可以有效降低奥沙利铂副作用，克服奥沙利铂耐药性的问题。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种双氢青蒿素在抗肿瘤药物的制备中的应用。

背景技术

结直肠癌(CRC)是全球第四大常见癌症，也是癌症相关死亡的主要原因之一。以奥沙利铂为基础的治疗方案是CRC最常用的化疗方法，但其副作用和耐药限制了其进一步的临床应用。因此，迫切需要一种能最大限度降低奥沙利铂副作用、提高其抗肿瘤活性的新型联合治疗策略。

双氢青蒿素(DHA)是青蒿素的衍生物，通过增加活性氧(ROS)的产生诱导多种癌细胞凋亡。然而，DHA的直接作用靶点以及DHA联合奥沙利铂治疗CRC的潜在分子机制仍不清楚。

发明内容

本发明提供了一种双氢青蒿素在抗肿瘤药物的制备中的应用，可以有效地克服奥沙利铂在治疗CRC中存在的耐药性和副作用上的问题。

本发明的技术方案如下：

一种双氢青蒿素在抗肿瘤药物的制备中的应用，所述抗肿瘤药物包含活性成分，所述的活性成分由双氢青蒿素和奥沙利铂组成。

作为优选，所述的抗肿瘤药物用于治疗结肠癌。

作为优选，所述的抗肿瘤药物用于抑制结肠癌细胞的增殖或用于诱导结肠癌细胞的凋亡。其中，低和高浓度的DHA在结肠癌细胞中发挥抗肿瘤活性，而高浓度DHA主要通过诱导细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。

针对具体的结肠癌细胞(HCT116细胞和RKO细胞)，作为优选，所述抗肿瘤药物中，奥沙利铂和DHA的摩尔比为12:1～3，作为进一步的优选，所述奥沙利铂的浓度为60μM，所述的DHA的浓度为5～15μM。此时，两者可以发挥较强的协同作用，增加对结肠癌细胞的抑制效果。

作为优选，在所述的抗肿瘤药物中，所述的双氢青蒿素通过改变ROS介导的多信号通路增强奥沙利铂在结直肠癌细胞中的抗肿瘤活性。

在本发明中，我们发现DHA通过调节ROS介导的内质网应激、转录激活因子3(STAT3)、c-jun氨基末端激酶(JNK)和p38信号通路协同增强奥沙利铂在结肠癌细胞中的抗肿瘤活性。DHA促进ROS生成通过抑制CRC细胞中过氧化物酶2(peroxiredoxin2，PRDX2)的表达。基因沉默PRDX2可致敏DHA介导的细胞生长抑制和ROS生成。此外，小鼠移植瘤模型显示DHA和奥沙利铂联合治疗比单一药物有更强的抗肿瘤作用。本发明为DHA和奥沙利铂联合用药在结直肠癌治疗的临床应用提供理论依据，也为PRDX2作为结直肠癌治疗的靶点提供新的实验依据和思路。

附图说明

图1.DHA引起结肠癌细胞的细胞毒性。(A和B)DHA减少了结肠癌细胞活性。HCT116(A)和RKO(B)细胞用浓度递增的DHA处理48小时，使用MTT实验分析细胞活性。两个不同细胞系中的IC₅₀值如图所示(n＝6)。(C和D)DHA对结肠癌细胞克隆形成能力的影响。HCT116(C)和RKO(D)细胞经过不同浓度的DHA处理24小时后，换用新鲜培养基继续培养7-8天后，用结晶紫染色液染色10分钟。使用Image J软件进行克隆形成实验数据的定量。(E和F)HCT116(E)或RKO(F)细胞贴壁汇合后，用移液枪尖端在细胞底部划线造成伤口，并用DHA处理，分析细胞迁移能力。(G和H)使用Annexin V/PI染色法分析DHA诱导结肠癌细胞凋亡的影响。HCT116(G)和RKO(H)细胞中显示的凋亡细胞百分比是Annexin V和PI染色双阳性的。三次独立实验，*p0.05,**p0.01,***p0.001。