[发明专利]一种筛选黄绿卷毛菇总多酚含量指标的DNA条形码

权利要求书

1.一种筛选黄绿卷毛菇总多酚含量指标的DNA条形码，其特征在于，所述DNA条形码的核苷酸序列包括：

如SEQ ID NO：3，

和/或SEQ ID NO：4,

和/或SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4组合，

和SEQ ID NO：7，

和/或SEQ ID NO：8，

和/或SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8组合，

和/或SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：13组合，

和/或SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14组合，

和/或SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14，

和/或SEQ ID NO：17，

和/或SEQ ID NO：18，

和/或SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18组合中的一种或多种。

2.一种扩增如权利要求1所述筛选黄绿卷毛菇总多酚含量指标的DNA条形码的引物组，其特征在于，所述引物组的核苷酸序列包括：

如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，

和/或SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，

和/或SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10，

和/或SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16中的一组或多组。

3.根据权利要求2所述的引物组，其特征在于，所述引物组的核苷酸序列包括：

如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，

和SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，

和SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10，

和SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16。

4.一种以总多酚含量指标筛选黄绿卷毛菇的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、提取待测样品基因组DNA；

S2、以S1基因组DNA为模板，选择权利要求2所述的一组或多组引物分别进行荧光PCR扩增反应，得扩增产物；

S3、S2所述扩增产物经毛细管荧光电泳检测，通过扩增产物的片段数、SSR位点数、SSR重复元件及其重复次数进行判定。

5.根据权利要求4所述的以总多酚含量指标筛选黄绿卷毛菇的方法，其特征在于，所述步骤S3的判定标准为：

SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2引物组扩增得到含5次AAG重复元件的229bp片段和含6次AAG重复元件的232bp片段；

和/或SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6含引物组扩增得到7次TCC重复元件的218bp片段和含8次TCC重复元件的221bp片段；

和/或SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10含引物组扩增得到含8次AT重复元件的233bp片段、含9次AT重复元件的235bp片段和含10次AT重复元件的237bp片段；

和/或SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16含引物组扩增得到含5次GCT重复元件的212bp片段和含6次GCT重复元件的215bp片段时，判定该黄绿卷毛菇为总多酚含量高的黄绿卷毛菇。

6.根据权利要求4所述的以总多酚含量指标筛选黄绿卷毛菇的方法，其特征在于，步骤S2所述荧光PCR扩增反应的反应体系为：

2×Taq PCR Master Mix 5μL，基因组DNA 1μL，上游引物0.1μL，下游引物0.4μL，带荧光的M13引物0.4μL，用无菌去离子水定容至10μL。

7.根据权利要求6所述的以总多酚含量指标筛选黄绿卷毛菇的方法，其特征在于，所述上游引物、下游引物和带荧光的M13引物浓度均为10uM。