[发明专利]一种玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物、制备方法及应用

权利要求书

1.一种玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物制备方法，其特征在于，所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物制备方法包括以下步骤：

步骤一，将玫瑰石斛生物碱粗提物，经常压硅胶柱色谱分离、石油醚-丙酮梯度洗脱以及TLC检测合并，共得到5个馏分Fr.1-Fr.5；

步骤二，将Fr.2经硅胶柱层析分离，经30：1的石油醚-丙酮等度洗脱和TLC检测合并，共得到5个馏分Fr.2.1-Fr.2.5；

步骤三，将Fr.2.1经凝胶柱色谱分离得到化合物1、化合物2和化合物3；

步骤四，将Fr.2.2经凝胶柱色谱及半制备液相等度分离纯化，得到化合物4和化合物6；

步骤五，将Fr.2.3经半制备液相等度分离纯化得到化合物8；

步骤六，将Fr.2.4经半制备液相梯度分离纯化得到化合物9、化合物10、化合物11和化合物12；

步骤七，将Fr.4经凝胶柱色谱，共得到6个馏分Fr.4.1-Fr.4.6，并将Fr.4.2经凝胶柱色谱分离得到化合物5和化合物7。

2.如权利要求1所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物制备方法，其特征在于，步骤一中，所述石油醚-丙酮梯度洗脱参数包括：50：1，30：1，20：1，15：1，10：1，5：1，2：1，丙酮。

3.如权利要求1所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物制备方法，其特征在于，步骤三中凝胶柱色谱的二氯甲烷：甲醇＝1：1；步骤四中，所述二氯甲烷：甲醇＝4：3，所述半制备液相为65％的乙腈-水，2mL/min。

4.如权利要求1所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物制备方法，其特征在于，步骤五中，所述半制备液相为70％的甲醇-水，2mL/min，254nm。

5.如权利要求1所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物制备方法，其特征在于，步骤六中，所述半制备液相为60-100％甲醇-水，30min，2mL/min，254nm。

6.如权利要求1所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物制备方法，其特征在于，步骤七中，所述Fr.4经过的凝胶柱色谱的二氯甲烷：甲醇＝1：1；所述Fr.4.2经过的凝胶柱色谱的二氯甲烷：甲醇＝2：1。

7.一种由权利要求1～6任意一项所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物制备方法制备得到的玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物，其特征在于，所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物的结构如下：

8.一种如权利要求7所述玫瑰石斛吲哚生物碱类化合物在对LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO抑制中的应用。