[发明专利]诱导蝴蝶兰种子产生多倍体并提高萌发率的方法

权利要求书

1.一种诱导蝴蝶兰种子产生多倍体并提高种子萌发率的方法，包括以下步骤：

(a)收集蝴蝶兰种子并分装到茶叶袋中；

(b)将所述种子灭菌；

(c)在液体培养基中培养灭菌后的所述种子，持续第一时间段，其中所述第一时间段为0-10d；

(d)向所述液体培养基中添加秋水仙素，使所述秋水仙素的浓度为0.05％-0.2％，处理第二时间段，其中所述第二时间段为1-5d；以及

(e)将步骤(d)所得种子播种至第一固体培养基，任选地，60d后统计其萌发率。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(c)中，所述液体培养基为：1/2MS+20g.L^-1蔗糖+100g.L^-1椰汁。

3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(e)中，所述第一固体培养基为：1/2MS+20g.L^-1蔗糖+100g.L^-1椰汁+5.0g.L^-1琼脂。

4.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(a)包括：采集蝴蝶兰果荚，用无菌水清洗，然后将不同果荚的种子混匀放入经灭菌的茶叶袋中。

5.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(b)包括：用无菌水清洗所述种子，再用75％酒精灭菌30s，之后用无菌水清洗，再用0.1％升汞灭菌10min，最后用清水清洗。

6.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(e)包括：将经过步骤(d)处理的种子晾干，然后播种到所述第一固体培养基中。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述第一时间段为0-5d，优选5d；和/或其中步骤(d)中，所述第二时间段为1-3d，优选1d。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中步骤(d)中，所述秋水仙素的浓度为0.1％-0.2％，优选0.2％。

9.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述蝴蝶兰是象鼻兰。

10.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，还包括步骤(f)：在种子萌发后，将其转接至第二固体培养基，所述第二固体培养基为：1/2MS+1.0mg.L^-16-BA+0.2mg.L^-1NAA+5.0g.L^-1琼脂+20g.L^-1蔗糖。