[发明专利]一种从大鲵肽中提取伏立诺他的方法

说明书

本发明公开了一种从大鲵肽中提取伏立诺他的方法，包括以下步骤：将大鲵肽溶解于水，得到大鲵肽水溶液；将大鲵肽水溶液进行吸附，去除大鲵肽水溶液中的弱极性有机分子；将步骤(2)中得到的洗脱液进行色谱洗脱，以分离目标物质；将步骤(3)中得到的物质用二甲基亚砜和乙醇的混合液进行洗脱；将步骤(4)中得到的洗脱液去除水分溶剂；将步骤(5)中得到的物料进行重结晶处理，得到白色晶体，白色晶体即为伏立诺他，得到的伏立诺他在‑20℃下保存。本发明填补了现有技术中大鲵肽能提取出伏立诺他的空白。

技术领域

本发明涉及生物医药提取技术领域，具体涉及到一种从大鲵肽中提取伏立诺他的方法。

背景技术

伏立诺他(vorinostat)，化学名为“N-羟基-N'-苯基辛二酰胺”或“辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)”，是美国Merck公司研发的首个组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂类抗肿瘤药。由于伏立诺他能够选择性的诱导肿瘤细胞的晚期分化，从而在适宜的条件下抑制该类细胞的增殖，因而，伏立诺他被用于治疗癌细胞不断增殖的肿瘤患者，在临床上也主要用于治疗加重、持续和复发或用两种全身性药物治疗后无效的皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL：一种非霍奇金淋巴瘤，是一种影响皮肤白细胞类型的T细胞癌)。

伏立诺他是一种白色至类白色结晶粉末，其2006年在美国批准上市，具有明显的抗癌功效。体外研究表明，伏立诺他在纳摩尔级浓度(IC 5086nmol/L)即可抑制HDAC1、HDAC2和HDAC3(Ⅰ型)以及HDAC6(Ⅱ型)酶活性。在某些癌细胞内，抑制过量的HDAC酶可激活正常细胞活性的基因。伏立诺他降低HDAC活性有助于减缓或中止癌细胞生长的基因激活。

大鲵属于脊索动物门，两栖纲，现属于我国二类野生保护动物。其体大而扁平，一般全长582～834毫米，头体长310～585毫米，最大个体全长可达200厘米以上。头大扁平而宽阔，头长略大于头宽。大鲵经济价值较大，群众将大鲵捕捉食用，以强壮体质，能有效地防治贫血、月经失调等症；大鲵的皮厚实坚韧，可以用以制革；还可制成治疗灼伤的药物；也可治疗小儿嗝食之类的胃病；胆汁能解热明目。

伏立诺他一般都是通过物质合成的，专利201410508747.8公开了一种抗癌药物伏立诺他的合成方法，合成方法包括(1)使辛二酸与苯胺在全氟磺酸树脂存在下反应得到辛酰苯胺酸；(2)辛酰苯胺酸与羟胺在缩合剂1,3-二环己基碳二亚胺存在下反应；(3)分离产物伏立诺他。此专利通过辛二酸与苯胺反应得到纯度高的中间产品辛酰苯胺酸，再将中间产品与羟胺反应后分离得到伏立诺他。

现有技术中，没有文献公开过大鲵中能提取出伏立诺他，也没有文献公开过从大鲵中提取伏立诺他的提取方法，本发明提出了一种大鲵肽中抗肿瘤药物伏立诺他的提取方法，提供了大鲵肽在抗肿瘤实验中具体成分作用的佐证。

发明内容

本发明的目的是提供一种从大鲵肽中提取伏立诺他的方法，用于解决现有技术中大鲵肽中能提取出伏立诺他的空白的技术问题。

为达上述目的，本发明的一个实施例中提供了一种从大鲵肽中提取伏立诺他的方法，包括以下步骤：

步骤(1)溶解：将大鲵肽溶解于水，得到大鲵肽水溶液；

步骤(2)吸附：将大鲵肽水溶液进行吸附，去除大鲵肽水溶液中的弱极性有机分子；

步骤(3)洗脱：将步骤(2)中得到的洗脱液进行色谱洗脱，以分离目标物质；

步骤(4)纯化：将步骤(3)中得到的物质用二甲基亚砜和乙醇的混合液进行洗脱；

步骤(5)去除水分溶剂：将步骤(4)中得到的洗脱液去除水分溶剂；

步骤(6)重结晶：将步骤(5)中得到的物料进行重结晶处理，得到白色晶体，白色晶体即为伏立诺他，得到的伏立诺他在-20℃下保存。

本发明优选的方案之一，步骤(2)中通过大孔吸附树脂吸附去除大鲵肽水溶液中的弱极性有机分子。