[发明专利]一种高效诱导巨噬细胞极化的体外培养方法

权利要求书

1.一种高效诱导巨噬细胞极化的体外培养方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1、在无血清条件下，将THP-1单核细胞用 PMA和 GM-CSF刺激，使其分化为巨噬细胞；

步骤2、使用20 ng/mL IFN-γ与100 ng/mL LPS诱导步骤1所分化的巨噬细胞24 h得到M1型巨噬细胞；

步骤3、使用20 ng/mL IL-4与20 ng/mL IL-10诱导步骤1所分化的巨噬细胞24 h后得到M2型巨噬细胞。

2.根据权利要求1所述的体外培养方法，其特征在于：所述步骤1中THP-1单核细胞由以下步骤分化为巨噬细胞：先将THP-1单核细胞在含10%胎牛血清的RPMI1640 培养基中进行培养扩增，然后换用无血清培养基，用100 ng/mL PMA和10 ng/mL GM-CSF刺激24 h，分化为巨噬细胞。

3.根据权利要求1所述的体外培养方法，其特征在于：所述步骤1分化的巨噬细胞置于RPMI1640 培养基中培养待用。

4.一组用于鉴定巨噬细胞基因水平的标志物，其特征在于，包括IL-1β、iNOS、Arg1、CD206、CD86，其中，IL-1β、iNOS、CD86为M1型巨噬细胞表面标志物，Agr1、CD206为M2型巨噬细胞表面标志物。