[发明专利]一种仔猪产肠毒素大肠杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一种仔猪产肠毒素大肠杆菌及其应用。所述猪产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli)已经保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.23598。所述的仔猪产肠毒素性大肠杆菌CGMCC No.23598可以用于仔猪腹泻疾病的防治研究，用于制备用于预防仔猪腹泻疾病的生物制品以及用于制备用于治疗仔猪腹泻疾病的生物制品。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种仔猪产肠毒素大肠杆菌及其应用。

背景技术

大肠杆菌病是危害新生或断奶仔猪较严重的传染性疾病之一，特别是断奶仔猪腹泻和仔猪水肿病常引起仔猪发育不良，饲养成本增高，严重时导致大量死亡。产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC)是一类引起人和幼畜(初生仔猪、犊牛、羔羊及断奶仔猪)腹泻的重要病原菌，初生幼畜被ETEC感染后，常因剧烈水样腹泻和迅速脱水而死亡，发病率和死亡率均很高。引起仔猪腹泻的大肠杆菌主要是ETEC，通过其菌毛黏附素与肠黏膜上皮细胞的受体结合而定植于肠道。ETEC可产生一种或几种肠毒素，包括耐热肠毒素(heat-stable enterotoxin，ST)和热敏肠毒素(heat-labile enterotoxin，LT)。ST和LT等肠毒素能改变肠细胞的吸收和分泌功能，引起血管内皮细胞的损伤，从而导致大量水份和电解质流向肠腔，临床上表现为水样腹泻。有研究表明，20％～30％的ETEC为LT+/ST－，30％～40％的ETEC为LT+/ST+，而ST+/ST－接近50％。所以肠毒素在ETEC性腹泻中扮演重要角色。由于大肠杆菌的血清型复杂，依靠疫苗难以对其控制，抗生素使用较为频繁。抗菌药物的长期使用，使得耐药菌株不断增多，耐药谱不断扩大，有效药物减少，导致发病后难以控制，给养殖业造成较大损失。

发明内容

本发明的目的是提供一种仔猪产肠毒素性大肠杆菌(EnterotoxigenicEscherichia coli)及其应用。

本发明的技术方案如下：

第一方面，本发明提供一株产肠毒素性大肠杆(Enterotoxigenic Escherichiacoli，ETEC)及其部分基因组序列。

本发明将某猪场的猪肠道组织接种麦康凯培养基上，37℃温箱培养约18-24小时，长出红色和白色菌落，挑取红色单菌落，进行纯化培养，目标菌落呈微桃红色、圆形、边缘整齐、表面光滑、湿润的菌落。经菌落纯化、传代及鉴定，得到一株ETEC(ST-/LT+)菌株，命名为ETEC-GS2020，其在普通肉汤上增殖稳定，滴度高达1.2×10⁹cfu/mL。本发明提供ETEC分离株的部分基因组序列，如SEQ ID N o.1所示。

本发明所提供的仔猪产肠毒素性大肠杆菌，分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，菌株名称为ETEC-GS2020，已于2021年10月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC No.23598。

其中，所述仔猪产肠毒素性大肠杆菌CGMCC No.23598的不耐热肠毒素基因序列的核苷酸序列如序列表中序列1所示。

第二方面，本发明提供了一种猪产肠毒素性大肠杆菌的应用。

仔猪产肠毒素性大肠杆菌CGMCC No.23598具有如下耐药特征：

所述仔猪产肠毒素性大肠杆菌CGMCC No.23598对头孢噻吩、呋喃妥因和丁胺卡那霉素超高敏。

所述仔猪产肠毒素性大肠杆菌CGMCC No.23598对头孢曲松、头孢他啶、阿奇霉素高敏，对头孢克肟、氯霉素、头孢呋辛、氧氟沙星、青霉素、链霉素、头孢唑啉、环丙沙星、诺氟沙星、庆大霉素、克拉霉素、万古霉素、利福平、多粘菌素B、恩诺沙星、红霉素和卡那霉素耐药。