[发明专利]一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，公开了一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法，包括：将能够在含苯甲酰二甲基铵类化合物的废水中正常生长的藻菌共生培养体系的沉积物作为种子株；将种子株接入苯甲酰二甲基铵类化合物和JTUK 12培养基中进行驯化，得到混合菌液；将能够正常生长的混合菌液通过稀释平板法进行分离，挑取单菌落重新接种至JTUK 12培养基中扩培，得到菌团。还公开了上述筛选方法筛选得到的菌团在降解苯甲酰二甲基铵类化合物中的应用。本发明筛选得到的菌团包括真菌和细菌中的多种菌种，丰富了苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌种库，同时能够高效降解苯甲酰二甲基铵类化合物，降解率高达92％以上。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种降解苯甲酰二甲基铵类化合物的方法。

背景技术

有研究表明，苯甲酰二甲基铵类化合物对大型溞、光合细菌和微藻等水生生物的半数有效浓度浓度范围为普遍低于200μg/L，而其在污水中的最高检出浓度高达2800μg/L，一旦含苯甲酰二甲基铵类化合物的废水被排入水生态系统后将会严重抑制水生生物的生长、繁殖，进而影响水生态系统的稳定性。因此开发出一种在苯甲酰二甲基铵类化合物融入生态环境前将其降解的方法十分重要。

近些年采用的离子吸附等物理化学方法处理苯甲酰二甲基铵类化合物虽有较好进展，但操作成本较高及处理效果易受废水其他成分影响，可考虑从微生物方法方面入手。目前有关处理苯甲酰二甲基铵类化合物的微生物方法的研究较少，已经报道的苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌种类非常有限，且其对苯甲酰二甲基铵类化合物的降解效率较低，仅为70％～80％。

发明内容

有鉴于此，本发明实施例通过提供一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法及其应用，用于解决现有降解苯甲酰二甲基铵类化合物的方法存在降解效率低的问题。

为了解决上述问题，本发明实施例提供了一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法，包括以下步骤：

S1，将能够在含苯甲酰二甲基铵类化合物的废水中正常生长的藻菌共生培养体系的沉积物为种子株；

所述藻菌共生培养体系为公开内容，市场上可用于处理废水的藻菌共生培养体系都可以用于本发明。

S2，将种子株接入苯甲酰二甲基铵类化合物和JTUK 12培养基中进行驯化，得到混合菌液；

S3，将混合菌液通过稀释平板法进行分离，挑取单菌落重新接种至液体JTUK 12培养基中扩培，得到菌团；

JTUK 12培养基为含有0.1-10g/L酵母提取物、10-50g/L葡萄糖、1.5-2.0g/LK₂HPO₄·3H₂O的BG 11培养基。

BG 11培养基包括硝酸钠1.5g/L、三水磷酸氢二钾0.04g/L、七水硫酸镁0.075g/L、二水氯化钙0.036g/L、柠檬酸0.006g/L、柠檬酸铁铵0.006g/L、EDTA0.001g/L、碳酸钠0.02g/L、硼酸0.00286g/L、一水氯化锰0.00181g/L、七水硫酸锌0.000222g/L、五水硫酸铜0.000079g/L、二水钼酸钠0.00039g/L、六水硝酸钴0.000049g/L，调节pH值7.1±0.1。

可选地，S1中，废水中苯甲酰二甲基铵类化合物浓度为0.1-160mg/L。

可选地，S2中，苯甲酰二甲基铵类化合物浓度为0.1-160mg/L。

可选地，菌团包括拟青霉属、威克汉姆酵母属、隐球菌属、毛霉属、曲霉属以及产碱杆菌属。

可选地，JTUK 12培养基中，葡萄糖的浓度为10g/L。

可选地，JTUK 12培养基中，酵母提取物的浓度为2g/L。