[发明专利]一种菌棒生物炭固定化菲降解菌剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种菌棒生物炭固定化菲降解菌剂的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：

(1)菌悬液制备：将菲降解菌Sphingobium abikonense在LB培养基中于恒温振荡器中震荡培养，然后离心，去除培养基成分后，再次用灭菌水重悬，在紫外-可见分光光度计波长为600nm处调节菌浓度，使其OD₆₀₀＝0.8，制得的菌悬液在冰箱4℃保存，作为后续生物炭固定的供试菌株；

(2)包埋固定：取灭菌菌棒生物炭粉末和菌悬液置于锥形瓶中，然后在恒温振荡器中震荡培养2-6h，制得吸附载体菌悬液；将吸附载体菌悬液与海藻酸钠水溶液等体积混合，在振荡器中振荡30min；超净台中移取该混合溶液匀速滴加到氯化钙水溶液中交联，静置，然后用无菌水冲洗颗粒，LB培养基里增殖培养3天，无菌水冲洗，即得到菌棒生物炭固定化菲降解菌剂。

2.根据权利要求1所述的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中菲降解菌Sphingobium abikonense在恒温振荡器中的培养条件：温度30℃，震荡速度170r/min，培养时间16h；离心转速为4000r/min，离心时间为5min。

3.根据权利要求1所述的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中LB培养基的制备方法为：将10g胰蛋白胨、5g酵母浸出汁和10g氯化钠混溶于1L蒸馏水中，调节pH至7.2，121℃高压灭菌20min。

4.根据权利要求1所述的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中菌棒生物炭：菌悬液＝1g：20mL。

5.根据权利要求1所述的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中菌棒生物炭粉末和菌悬液在恒温振荡器中的培养条件：温度为30℃，振荡速度为170r/min。

6.根据权利要求1所述的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂的制备方法，其特征在于，所述菌棒生物炭为过100目筛的颗粒。

7.根据权利要求1所述的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂的制备方法，其特征在于，所述菌棒生物炭的制备方法为：以风干的菌棒为试验材料，将过20目筛的菌棒样品于陶瓷容器中，压实后盖上盖子，置于可控温马弗炉中在400℃条件下热解2h，经冷却至室温后取出，取部分样品研磨过100目筛，制得菌棒生物炭，装于密封袋中置于干燥器内备用。

8.一种如权利要求1所述制备方法得到的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂。

9.一种如权利要求8所述的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂在菲降解方面的应用。

10.根据权利要求9所述的菌棒生物炭固定化菲降解菌剂在菲降解方面的应用，其特征在于，所述菲降解菌剂对铜菲复合污染有显著修复效果。