[发明专利]一种外加电场作用下微流控离心式挤压的细胞转染系统在审
申请号: | 202111437337.5 | 申请日: | 2021-11-29 |
公开(公告)号: | CN114181825A | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 陈建锋;柳菡;宋一羽;陈雪飞;侯冉;陈笑笑;易美荣;钟敏;许文虎 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12M1/00;C12N15/87;B01L3/00 |
代理公司: | 南昌金轩知识产权代理有限公司 36129 | 代理人: | 石英 |
地址: | 330000 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 外加 电场 作用 下微流控 离心 挤压 细胞 转染 系统 | ||
1.一种外加电场离心挤压式的微流控细胞转染系统,包括上亚克力光盘碟体,所述上亚克力光盘碟体与下光盘体通过卡榫或是凹凸嵌合的方式进行连接;其特征在于:还包括下亚克力光盘碟体和电场提供装置;
所述下亚克力光盘碟体设置在所述上亚克力光盘碟体下方;
所述上亚克力光盘碟体与所述下亚克力光盘碟体组成双层复合碟体架;
所述双层复合碟体架于离心平台上;
所述下亚克力光盘碟体刻划多组微流道;
所述下亚克力光盘碟体设有数个储存槽;
所述储存槽包括前储存槽和后储存槽;
所述前存储槽含有两个输液孔;
所述后储存槽下方设置微流阀门;
所述电场提供装置包括正极、负极、滑环。
2.根据权利要求1所述的一种外加电场离心挤压式的微流控细胞转染系统,其特征在于:所述上亚克力光盘碟体为密封且透明。
3.根据权利要求1所述的一种外加电场离心挤压式的微流控细胞转染系统,其特征在于:所述微流道为沙漏状微流体通道,具有受限空间。
4.根据权利要求1所述的一种外加电场离心挤压式的微流控细胞转染系统,其特征在于:所述电场提供装置提供向下电场。
5.根据权利要求1所述的一种外加电场离心挤压式的微流控细胞转染系统,其特征在于:所述滑环可用于防止导线绕线。
6.一种可用于权利要求1-5任一所述的一种外加电场离心挤压式的微流控细胞转染系统的方法,包括以下步骤:
准备阶段:
S1:将上亚克力光盘碟体与下亚克力光盘碟体通过卡榫或是凹凸嵌合的方式进行连接,形成一个双层复合碟体之后,架于离心平台上;
S2:将待转染细胞与转染物质依次注入前储存槽的两个输液孔,输入液体在毛细力作用下存储在前储存槽中;
S3:将正负极电路连接完毕,使其产生向下的电场;
实验阶段:
S4:启动离心平台;
当微流体碟体处于低转速离心时,液体在储存槽通往微流阀门的入口处会形成一层液气表面,此时液体的内部有在离心作用下所形成的液体压力,而在液气表面上会因表面张力产生一阻止液体前进的毛细压力,当液体压力低于毛细压力时,液体会保留在储存槽中,而随着离心转速提高,液体压力跟着增加,直到液体所受的离心力大于毛细压力时,便会突破微流道限位口,细胞通过离心力的作用通过微流道。此时细胞的细胞膜被限位口挤压,在短时间内发生细胞膜破裂,待输运的物质在后储存槽内通过暂时破裂的细胞膜进入细胞内,同时细胞收到电场影响,在短时间内发生细胞核膜破裂,待输运的物质通过破裂的细胞核膜进入细胞核内,一段时间后细胞的细胞膜、细胞核膜恢复,完成各种物质的细胞内输运。
取样阶段:
S5:通过吸管从后储存槽下方设置的微流阀门将细胞悬浮液吸出。
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