[发明专利]一种具有抗衰老的自体干细胞模型的构建方法在审
申请号: | 202111446770.5 | 申请日: | 2021-11-30 |
公开(公告)号: | CN114181897A | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 李相鲁;张严冬;张兆辰 | 申请(专利权)人: | 东莞市麦亘生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/28;A61P39/00 |
代理公司: | 北京冠和权律师事务所 11399 | 代理人: | 朱健 |
地址: | 523000 广东省东莞市松山*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 衰老 干细胞 模型 构建 方法 | ||
本发明公开了一种具有抗衰老的自体干细胞模型的构建方法,包括以下步骤:S1、从脂肪组织中获取基质血管成分,并从基质血管成分中分离得到原代脂肪干细胞,对原代脂肪干细胞进行一次继代培养,获得脂肪干细胞;S2、用加入转铁蛋白、白蛋白和油酸的干细胞培养基培养5~10天;S3、所述干细胞培养基中,转铁蛋白的含量为8~20ng/mL,白蛋白的含量为8~20ng/mL,油酸的含量为25~60ng/mL。本发明该方法建立自体干细胞体外衰老细胞模型,可以缩短造模时间,操作简单,易普及且致衰老效果明显。
技术领域
本发明属于生物医学技术领域,特别是涉及一种具有抗衰老的自体干细胞模型的构建方法。
背景技术
衰老是人体随着年龄增长、环境影响而发生的组织、器官、细胞的功能退行性变化,表现为机体的功能活动能力进行性下降,对环境的适应能力逐渐降低,体内代谢平衡失调,进而导致面色苍老、皮肤松弛、皱纹增多、易疲劳、脑力和体力劳动能力下降、性功能减退等一系列衰老症状。由于衰老是全身系统性组织、器官功能退化,因此,抗衰老和整形的策略也应考虑从整体水平改善功能。
干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能性细胞。干细胞可以对多种组织、器官、系统的老化退行性病变进行再生性修复,使其结构和功能正常化、年轻化,从整体上调控机体状态,是一种全身性、系统性、根本性的保健。
脂肪干细胞(adipose-derivedstemcells,ADSCs)是一种具有多向分化潜能的干细胞,ADSCs在体外稳定增殖且衰亡率低,在体内体外具有多向分化潜能,在不同的诱导因子作用下可以向脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、成骨细胞、神经细胞、神经胶质细胞及胰岛细胞分化,而且可以分泌多种促血管生成因子和抗凋亡因子。脂肪干细胞来源广泛、取材容易、对机体损伤小,体内储备量大、少量组织即可获取大量干细胞,且适宜自体移植和大规模培养,因此脂肪干细胞逐渐成为近年来的研究热点之一,同时也为一系列疾病的治疗提供了新的思路。
发明内容
本发明主要解决的技术问题是提供一种具有抗衰老的自体干细胞模型的构建方法,该方法建立自体干细胞体外衰老细胞模型,可以缩短造模时间,操作简单,易普及且致衰老效果明显。
为解决上述技术问题,本发明采用的一个技术方案是:一种具有抗衰老的自体干细胞模型的构建方法,包括以下步骤:
S1、从脂肪组织中获取基质血管成分,并从基质血管成分中分离得到原代脂肪干细胞,对原代脂肪干细胞进行一次继代培养,获得脂肪干细胞;
S2、用加入转铁蛋白、白蛋白和油酸的干细胞培养基培养5~10天;
S3、所述干细胞培养基中,转铁蛋白的含量为8~20ng/mL,白蛋白的含量为8~20ng/mL,油酸的含量为25~60ng/mL。
进一步地说,所述干细胞培养基中,转铁蛋白的含量为9~12ng/mL,白蛋白的含量为9~12ng/mL,油酸的含量为27~35ng/mL。
进一步地说,培养过程中,每2~3天更换干细胞培养基。
进一步地说,所述干细胞培养基为无血清培养基。
进一步地说,所述干细胞培养基中还含有链霉素和青霉素。
所述的构建方法所获得的具有抗衰老的自体干细胞模型。
所述的一种具有抗衰老的自体干细胞模型用于筛选抗衰老药物。
本发明的有益效果:通过本发明方法建立自体干细胞体外衰老细胞模型,可以缩短造模时间,操作简单,易普及且致衰老效果明显。而且,所获得的衰老细胞模型不易凋亡,在模型建立后仍可存活较长时间,超过3天,可以用来筛选抗衰老的药物。
附图说明
图1是本发明脂肪干细胞培养24小时的40倍显微镜图像。
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