[发明专利]一株高产EPA油脂的陆生魏氏藻及其应用

说明书

本发明公开了一株高产EPA油脂的陆生魏氏藻及其应用。对分离自荒漠生物土壤结皮中的藻株WL1进行18S rDNA序列分析和显微形态鉴定，确定其属于魏氏藻。该藻株在批次培养模式下，藻细胞中积累的中性脂占总油脂的80％以上，脂肪酸组成以棕榈油酸、油酸、亚麻酸为主，可以占到总油脂脂肪酸的70％以上，适合生物柴油的生产，同时含有人体所需的不饱和脂肪酸二十碳五烯酸，且占总脂肪酸含量达到10％以上。

技术领域

本发明涉及具有在藻细胞中积累大量高含EPA油脂能力的魏氏藻藻株及其应用，具体涉及一株魏氏藻的分离、鉴定及培养。

背景技术

二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)属于Ω-3多不饱和脂肪酸，是人体自身不能合成但又不可缺少的重要脂肪酸。在日常饮食基础上增加EPA的摄入、吸收对预防和治疗动脉硬化、脑血栓和高血压等具有明显效果。EPA的开发和利用已成为保健品和医药领域的热点之一，目前EPA的商业来源主要是深海鱼油，但深海鱼油生产成本高，且产量不能满足市场需求。随着EPA的拓展应用和需求增加，开发新的EPA原料来源十分重要。

微藻是一类能进行光合作用的真核藻类，微藻可以通过光合作用将二氧化碳固定、转化为有机碳，并将有机碳以油滴的形式储存于藻细胞内形成微藻油脂。微藻油脂中含有丰富的EPA，并且与深海鱼油相比，具有不含胆固醇、脂肪酸组成更加稳定、无鱼腥臭味和重金属元素污染的优点。微藻的藻细胞内还含有蛋白质、碳水化合物以及各种矿物质，因此提取油脂后的微藻残渣仍具有加工为其他产品的附加值。在微藻油脂成分和生产技术的研究中涉及的藻种包括三角褐指藻、盐藻、微绿球藻和蛋白核小球藻，这些微藻利用简单的矿质元素即可生长，培养成本低、收获快，通过控制培养条件和利用代谢工程手段可以提高油脂的含量，已部分实现产业化应用，其中功能油脂和生物柴油作为两个主要方向发展迅速。但目前实现应用的藻种大多为淡水和海洋微藻，其作为水生微藻在进行培养时存在诸多问题，如杂菌污染、微囊藻毒素残留和重金属富集。

荒漠生物土壤结皮是荒漠生态系统的重要组成部分，由细菌、微藻等生物体与土壤颗粒联结而成。荒漠微藻具有抗逆性强、不饱和脂肪酸含量高的特点。魏氏藻属(Visheria sp.)是Pascher在1937年命名的一类单细胞黄绿色藻，属于绿藻门、真眼点藻纲、真眼点藻目(Eustigmatales Hibberd)、真眼点藻科(Eustigmataceae Hibberd)，多生长在淡水和土壤颗粒中。魏氏藻的营养细胞为球形，大多直径为10-11μm，细胞质中含有液泡，内含能够震动的颗粒。其含油水平可达50％以上，且油脂中含有如EPA等优质脂肪酸。

目前已公开的专利中，已有部分关于微藻生产EPA油脂的相关技术：

1)一种利用类波氏真眼点藻生产EPA的方法(CN102618592A)。该中国专利利用类波氏真眼点藻生产EPA油脂，通过胁迫培养后总脂含量可占细胞干重的66％(大多为三酰甘油TAG)。但EPA占总脂肪酸的8.6％，且在一般培养条件下藻细胞油脂中EPA含量更低，因此EPA生产能力较弱，不利于工业生产。

2)一株利用海水培养的魏氏藻及其用途(CN111349566A)。该中国专利通过海水培养魏氏藻藻株LQ-1984，该藻株的ω-7脂肪酸相对含量高，EPA的相对含量也达到10％。但是随着海水盐度增加至15％时，EPA的含量下降迅速，即生产EPA的潜力不足。此外，魏氏藻藻株LQ-1984中性脂的脂肪酸种类少，例如不含亚麻酸。

发明内容

本发明的目的在于提供一株高产EPA油脂的陆生魏氏藻及其应用。本发明提供的魏氏藻藻株对环境的适应力强、油脂含量高，可用于微藻生物柴油和EPA的生产。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

该株高产EPA油脂魏氏藻的名称为Visheria sp.WL1(即魏氏藻藻株WL1)，其保藏编号为CCTCC NO：M 20211209。