[发明专利]S蛋白基因及其在猪δ冠状病毒疫苗中的应用

说明书

本发明公开一种S蛋白基因及其在猪δ冠状病毒疫苗中的应用，所述S蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明提供的猪δ冠状病毒疫苗包含由S蛋白基因编码出的S蛋白，或装有S蛋白基因的重组质粒转化得到的重组菌菌液，该疫苗不仅能够在病毒主要靶器官小肠肠道黏膜上定居，能够有效防治PDCoV，且在使用时没有活毒传播风险，安全性良好，对动物健康和生态环境无潜在的影响和威胁；此外，由重组菌菌液直接制备得到的疫苗不需要经过纯化工序，生产工艺简单易实现，生产效率高、成本低。

技术领域

本发明涉及兽用生物制品技术领域，特别涉及一种S蛋白基因及其在猪δ冠状病毒疫苗中的应用。

背景技术

猪丁型冠状病毒又称猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)，是一种新出现的可导致猪发生严重腹泻甚至死亡的冠状病毒。PDCoV可以感染各个阶段的猪群，但主要感染哺乳仔猪，引起严重的萎缩性肠炎，临床症状表现为仔猪腹泻、呕吐、脱水，引起小猪的死亡率30％～40％，给养猪业带来了较重的经济损失。因此，研制有效的疫苗进行该病的防控是急需解决的问题。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种S蛋白基因及其在猪δ冠状病毒疫苗中的应用，该猪δ冠状病毒疫苗能够有效防治PDCoV，且在使用时安全性良好。

为实现上述目的，本发明提出一种S蛋白基因，所述S蛋白基因的核苷酸序列如SEQID NO：1所示。

本发明还提出一种S蛋白，由如上文所述的S蛋白基因编码得到，其特征在于，所述S蛋白具有如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

本发明还提出一种重组质粒，所述重组质粒包括如上文所述的S蛋白基因。

可选地，包含乳酸菌表达载体pVE5523。

本发明还提出一种重组菌株，所述重组菌株包含如上文所述的S蛋白基因。

可选地，所述重组菌株由携带所述S蛋白基因的重组质粒转化干酪乳杆菌标准菌株ATCC393获得。

本发明还提出一种猪δ冠状病毒疫苗，所述猪δ冠状病毒疫苗包括如上文所述的S蛋白，或如上文所述的重组菌株的菌液。

可选地，包括所述重组菌株菌液和冻干保护剂；和/或，

所述重组菌株菌液的OD600为1.0～1.2。

可选地，所述猪δ冠状病毒疫苗为口服疫苗。

本发明还提出一种猪δ冠状病毒疫苗的制备方法，包括以下步骤：

培养如上文所述的重组菌株得到菌液，将菌液冻干处理，得到猪δ冠状病毒疫苗。

本发明提供的猪δ冠状病毒疫苗包含由S蛋白基因编码出的S蛋白，或装有S蛋白基因的重组质粒转化得到的重组菌菌液，该疫苗不仅能够在病毒主要靶器官小肠肠道黏膜上定居，能够有效防治PDCoV，且在使用时没有活毒传播风险，安全性良好，对动物健康和生态环境无潜在的影响和威胁；此外，由重组菌菌液直接制备得到的疫苗不需要经过纯化工序，生产工艺简单易实现，生产效率高、成本低。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅为本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为实施例1中合成的pUC57-PDCoVS质粒双酶切后的琼脂糖凝胶电泳图；

图2为实施例1中重组质粒pVE5523-PDCoVS质粒双酶切后的琼脂糖凝胶电泳图。