[发明专利]一株酸橙内生细菌及其应用

说明书

本发明公开了一株酸橙内生细菌及其应用，属于线虫防治技术领域。内生细菌为苏云金芽孢杆菌，苏云金芽孢杆菌已于2021年11月1日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23700，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。该菌株发酵液对二龄线虫的校正致死率为93.37％，稀释到5倍以后线虫死亡率仍有77.89％；3d时Bt028发酵滤液对根结线虫虫卵孵化抑制率最高为71.63％。Bt028发酵液能够显著降低根结线虫卵囊过氧化氢酶、乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的活性以及卵囊总糖和总蛋白含量。该菌株能抑制线虫体内的正常代谢、降低线虫抵抗力，导致线虫机体的损伤或死亡。

技术领域

本发明涉及线虫防治技术领域，特别是涉及一株酸橙内生细菌及其应用。

背景技术

根结线虫是一种高度专化型的杂食性植物病原线虫。可通过口针吸取植物营养，对植物地下根部，地上茎、叶和果实等造成极大危害，还能传播一些真菌和细菌性病害。目前常用的杀线虫剂分为化学制剂和生物制剂两类，化学制剂毒性高、残留大，并且随着多年化学试剂的大量使用，线虫对农药的抗性不断的提高，常规的化学农药的实际防治效果越来越差。相较于传统的化学试剂，生物试剂高效、低毒，对人畜安全，不会留下农残隐患，更为绿色安全。随着生物农药的开发和推广，市场上生物农药也在不断的增加，但是目前还没有针对线虫不同龄期进行防治的效果良好的生物制剂。因此，寻找一种性能优良的微生物菌株仍是当前杀线虫生物制剂的主要研究方向之一。

发明内容

本发明的目的是提供一株酸橙内生细菌及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，该菌具有几丁质酶活性，并且在防治根结线虫虫害中具有良好的效果，其对根结线虫的致死率可达93.37％，为防治根结线虫提供了新的菌源。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一株酸橙内生细菌，所述内生细菌为苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)，所述苏云金芽孢杆菌已于2021年11月1日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23700，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

本发明还提供一种酸橙内生细菌的发酵方法，包括以下步骤：

(1)将所述的酸橙内生细菌活化后，接入发酵培养基，振荡培养制备种子液；

(2)将所述种子液接种于所述发酵培养基，振荡培养制备发酵液。

优选的是，所述发酵培养基包括以下质量浓度的组分：8g/L淀粉、10g/L胶体几丁质和20g/L蛋白胨，pH为7.0。

优选的是，步骤(1)中，所述种子液的培养条件：温度30℃，转速150r/min振荡培养24h；

步骤(2)中，所述发酵液的培养条件为：所述种子液按照5％的接种量接入所述发酵培养基，于30℃、转速150r/min振荡培养48h。

本发明还提供一种菌剂，包括所述的内生细菌及其代谢物。上述代谢物可以是根据上述发酵方法制备的发酵液，也可以是从发酵液中提取的化学组分，但也不限于此。

本发明还提供所述的酸橙内生细菌或其代谢物在制备杀南方根结线虫制剂中的应用。

本发明还提供所述的酸橙内生细菌或其代谢物在防治南方根结线虫病害中的应用。

本发明公开了以下技术效果：