[发明专利]一种6-苯甲基腺嘌呤半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种6‑苯甲基腺嘌呤半抗原、人工抗原、抗体及其制备和应用，本发明制备得到了一种6‑苯甲基腺嘌半抗原6‑BA‑2C，应用半抗原6‑BA‑2C偶联载体蛋白BSA得到人工抗原6‑BA‑2C‑BSA，并进一步制备得到用于检测6‑苯甲基腺嘌呤的特异性抗体，应用人工抗原6‑BA‑2C‑OVA作为包被原，该抗体对6‑苯甲基腺嘌呤具有良好的灵敏度和特异性，半抑制浓度为1.18μg/Kg，最低检测限为0.056μg/Kg，定量检测范围为0.17～61.04μg/Kg，对玉米素、反玉米素、N6‑苯甲酰基腺嘌呤均无交叉反应，利用本发明的抗体建立了特异性和灵敏度更高的6‑苯甲基腺嘌呤的免疫分析方法。

技术领域

本发明涉及食品安全检测技术领域，更具体地，涉及一种6-苯甲基腺嘌呤半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

背景技术

6-苯甲基腺嘌呤(6-Benzylaminopurine，6-BA)，别名6-苄基腺嘌呤或6-苄基氨基嘌呤，是第一个人工合成的腺嘌呤细胞分裂素，它常被广泛添加于植物生长培养基里作为促长剂和保鲜剂使用。6-BA的主要成份是嘌呤类生物碱和一些无机物，具有促进种子萌发和胚芽细胞分裂，还具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质的分解，保绿防老等多种效能，广泛用于调节植物生长发育以及蔬菜、水果的保鲜和储存。由于6-BA的药效良好、价格低廉，目前已被广泛当成一种生长调节剂用于无根豆芽的种植中，成为食品安全领域的一个重大问题。

然而，人体摄入过多的6-BA会刺激皮肤黏膜，造成食道、胃黏膜损伤，出现恶心、呕吐等现象。为确保豆芽及其制品食用安全，根据《中华人民共和国食品安全法》《中华人民共和国农产品质量安全法》等相关法律的规定，原国家食品药品监督管理总局、农业部、国家卫生和计划生育委员会在2015年发布公告，严禁在豆芽生产过程中使用6-苄基腺嘌呤等植物生长调节剂类物质。因此，加强芽菜中的6-BA残留量的检测对于保证食品质量安全十分重要。

有关6-BA在芽菜类的残留分析方法国内外已有一些报道。目前，对于6-BA残留的检测方法主要有高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)、气相色谱(Gas Chromatography，GC)、气相色谱-质谱联用(Gas Chromatography-MassSpectrometer，GC-MS)以及高效液相-质谱联用(High Performance LiquidChromatography-Mass Spectrometer，HPLC-MS)等方法。这些方法虽然结果可靠，灵敏度高，但需要昂贵的仪器、专业人员操作，检测步骤繁琐，因此这些方法一方面不能实现现场快速检测的目的；另一方面也很难在我国基层单位得以推广。

与仪器分析方法相比，免疫检测方法因其具有特异性强、操作简便、可实现大量样品的快速检测等特点，在农药残留检测领域中受到越来越多的关注。因此，建立高效的免疫检测方法很有必要，然而该方法是由抗原和抗体的性能决定的，要得到针对的抗原和抗体，关键在于相应半抗原的结构设计。因此，迫切需要提供一种能够产生针对6-苯甲基腺嘌呤特异性更高的抗体的半抗原和人工抗原。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术中6-苯甲基腺嘌呤免疫检测特异性的缺陷和不足，提供一种6-苯甲基腺嘌呤半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

本发明的目的在于提供一种6-苯甲基腺嘌呤半抗原。

本发明的目的还在于提供6-苯甲基腺嘌呤半抗原在制备6-苯甲基腺嘌呤人工抗原中的应用。

本发明的目的还在于提供6-苯甲基腺嘌呤人工抗原。

本发明的目的还在于提供所述6-苯甲基腺嘌呤半抗原和/或人工抗原在制备6-苯甲基腺嘌呤人工抗体中的应用。

本发明的目的还在于提供一种6-苯甲基腺嘌呤抗体。

本发明的目的还在于提供一种检测6-苯甲基腺嘌呤的试剂盒。