[发明专利]Toll样受体9(TLR9)激动剂水凝胶免疫调节组合物

说明书

本发明涉及免疫调节多核苷酸和包含TLR9激动剂和水凝胶的免疫调节组合物。本发明还涉及向受试者施用所述免疫调节组合物以调节受试者免疫应答和/或治疗癌症。

技术领域

本发明涉及包含TLR9激动剂和水凝胶的免疫调节多核苷酸和免疫调节组合物。本发明还涉及施用包含TLR9激动剂和水凝胶的免疫调节多核苷酸或免疫调节组合物以调节免疫应答和/或治疗癌症。

背景技术

未甲基化的CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)是先天免疫受体Toll样受体9(TLR9)的已知配体。含有未甲基化CpG基序的DNA可以激活TLR9从而产生有效的Th1型先天和适应性免疫反应(Hemmi,et al.Nature,2000,408,740–745)。TLR9激动剂可应用于免疫肿瘤学、哮喘过敏、传染病和疫苗佐剂。近年来，免疫检查点抑制剂(CPI)已经改变了癌症治疗方法。然而，只有少数(10-30％)的患者从CPI治疗中受益，而且CPI复发或难治患者的治疗选择有限。越来越多的证据表明，肿瘤微环境(TME)可以通过直接肿瘤内注射免疫刺激剂(如TLR9激动剂)来控制，这些免疫刺激剂会增加T细胞浸润，导致“冷”肿瘤转变为对CPI治疗有反应的“热”肿瘤。目前，几种TLR9激动剂与检查点抑制剂(CPI)联合用于癌症患者的后期临床试验。在这些试验中，TLR9激动剂通常每周给药一次，持续数周，这表明它们可能在局部组织中降解或从需要每周给药一次的作用部位迅速消散。本发明通过使用由泊洛沙姆嵌段共聚物(poloxamer block copolymers)和其他组分组成的水凝胶制剂改进了TLR9激动剂递送和活性的持久性。

发明内容

发明人已经发现了免疫调节多核苷酸和使用这些免疫调节多核苷酸调节个体(特别是人类)免疫反应的方法。本发明的组合物包含如本文进一步描述的免疫调节多核苷酸。

未甲基化的CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)是先天免疫受体TLR9的已知配体。TLR9对CpG ODN的感应导致刺激免疫级联反应，其以Th1型细胞因子(包括IFN-α)和趋化因子环境的分泌和免疫细胞表面标志物的激活为代表。目前，几种TLR9激动剂与检查点抑制剂(CPI)联合用于癌症患者的后期临床试验。在这些试验中，TLR9激动剂通常每周给药一次，持续数周，表明其可能在局部组织中降解或从作用部位迅速消散，因此需要每周给药一次。为了在降低给药频率的情况下提高TLR9激动剂活性的稳定性、递送和持久性，我们将TLR9激动剂封装(encapsulated)在含有泊洛沙姆的可注射水凝胶中。TLR9激动剂/水凝胶制剂可用于在瘤周(peritumoral)/瘤内(intratumoral)注射或通过其他给药途径后减缓TLR9激动剂的释放。临床试验中通常使用每周一次的TLR9激动剂瘤内注射。使用TLR9激动剂的水凝胶制剂可以实现更低的给药频率，并且理想地匹配检查点抑制剂的给药频率。水凝胶配制的TLR9激动剂还可以显著扩大可使用TLR9激动剂治疗的患者群体，包括那些原本不适合肿瘤内注射的肿瘤患者。我们开发了TLR9激动剂，评估了它们的免疫刺激潜力，并研究了它们在水凝胶中封装和不封装的情况，以评估小鼠同源肿瘤模型中的肿瘤生长抑制和毒性。

发明人设计了一系列TLR9激动剂(见表1)和水凝胶制剂(见表3)，其中在封装有本文中称为“C-3”的激动剂的水凝胶制剂已经显示出更高的细胞因子诱导和更好的抗肿瘤活性，这在小鼠的CT26肿瘤模型中进行了测试。与临床候选物SD-101(见表1)相比，本发明的TLR9激动剂显示出非劣效的肿瘤生长抑制。

在本发明的一个方面中，本发明提供一种免疫调节组合物，其包含：

(1)免疫调节多核苷酸(优选地所述免疫调节多核苷酸为TLR9激动剂)，以及

(2)水凝胶，所述水凝胶包含：

(a)一种或多种泊洛沙姆嵌段共聚物，其在所述水凝胶中的浓度为18％-40％(w/w)，和/或

(b)分子量为50-100kDa的透明质酸，其在所述水凝胶中的浓度为0-0.5％(w/w)，和/或