[发明专利]雄黄微生物浸出液在制备降低蛋白激酶B磷酸化水平药物中的应用

说明书

本发明属于生物医药领域，涉及一种雄黄微生物浸出液的新用途，具体涉及一种雄黄微生物浸出液在制备降低蛋白激酶B磷酸化水平的药物中的应用。本发明所提供的雄黄微生物浸出液可以显著降低细胞中蛋白激酶B的磷酸化水平，能够用于糖尿病和癌症的治疗。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种雄黄微生物浸出液的新用途，具体涉及一种雄黄微生物浸出液在制备降低蛋白激酶B磷酸化水平的药物中的应用。

背景技术

蛋白激酶B，又称为AKT，是一种分子量约为60kDa的丝/苏氨酸蛋白激酶，AKT可分为3种亚型(AKT1、AKT2、AKT3)，3种亚型的功能各异，但也有重叠。AKT1广泛地分布在组织中，AKT2主要分布在肌肉和脂肪细胞中，而AKT3则在睾丸和大脑中表达。AKT调控多个生物过程，包括细胞存活、增殖、生长和糖原代谢，已经发现AKT信号通路与糖尿病、癌症等疾病的发生发展密切相关。

蛋白质磷酸化是调节和控制蛋白质活力和功能的最基本、最普遍，也是最重要的机制。蛋白质磷酸化主要发生在两种氨基酸上，一种是丝氨酸(包括苏氨酸)，另一种是酪氨酸。丝氨酸磷酸化的主要作用是变构蛋白质以激活蛋白质的活力，主要是指酶活力。因此药物通过降低AKT信号通路中AKT的磷酸化水平可以反应出药物对糖尿病、癌症等疾病产生影响，进而可以认为其具有治疗糖尿病、癌症等疾病的潜力。

本发明意外发现雄黄微生物浸出液(RTS)可以高效降低AKT的磷酸化水平，能够用于糖尿病和癌症的治疗。

发明内容

本发明的目的在于发现一种雄黄微生物浸出液的新用途。具体是雄黄微生物浸出液在制备降低蛋白激酶B磷酸化(p-AKT)水平药物中的应用。进一步的，所述降低蛋白激酶B磷酸化(p-AKT)水平的药物为治疗糖尿病或癌症的药物。

本发明的另一个目的是提供一种雄黄微生物浸出液(RTS)，所述雄黄微生物浸出液通过以下制备方法获得：

将雄黄粉末和氧化亚铁硫杆菌液分别加入到浸出培养基中，雄黄粉末和氧化亚铁硫杆菌液质量体积比为1：10，浸出培养基与氧化亚铁硫杆菌液体积比为1000：9000，于30℃恒温振荡浸出25-30天，转速150-200rpm，浸出后去除浸出液中的菌体，得到雄黄微生物浸出液。

优选的，所述浸出培养基为1K液体培养基(g/L)：(NH₄)₂SO₄3.0g，K₂HPO₄0.5g，KCl0.1g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，Ca(NO₃)₂0.01g，FeSO₄·7H₂O 4.98g，用蒸馏水定容至1L。

优选的，所述去除浸出液中的菌体的方法是过滤除菌或离心除菌。

优选的，所述氧化亚铁硫杆菌液浓度为3×10⁷个/mL。

另外上述所用到的氧化亚铁硫杆菌也可以为驯化的氧化亚铁硫杆菌。

所述驯化的氧化亚铁硫杆菌驯化流程为：取氧化亚铁硫杆菌，用200μg亚砷酸钠/100ml 9K培养基、400μg亚砷酸钠/100ml 9K培养基、600μg亚砷酸钠/100ml 9K培养基、800μg亚砷酸钠/100ml 9K培养基、1600μg亚砷酸钠/100ml 9K培养基梯度驯化，然后再取0.1g雄黄/100ml9K培养基、0.2g雄黄/100ml 9K培养基、0.3g雄黄/100ml9K培养基、0.5g雄黄/100ml 9K培养基、1.0g雄黄/100ml 9K培养基梯度驯化氧化亚铁硫杆菌，上述驯化流程每步5天，共50天后得驯化的氧化亚铁硫杆菌。

本发明的有益效果是：雄黄微生物浸出液可以明显降低细胞中蛋白激酶B的磷酸化水平，能够用于糖尿病和癌症的治疗。

附图说明