[发明专利]一种获得性再生障碍性贫血模型小鼠的生产方法

说明书

本发明公开了一种获得性再生障碍性贫血模型小鼠的生产方法，包括对小鼠每日腹腔注射一次环磷酰胺和环孢霉素，所述环磷酰胺的用量为50mg/kg/d，所述环孢霉素的用量为5mg/kg/d，所述环磷酰胺和环孢霉素的注射间隔时间为3～5分钟，连续注射14天。本发明的方法生产的获得性再生障碍性贫血模型小鼠可用于研究获得性再生障碍性贫血。

技术领域

本发明属于医药领域，特别是涉及一种获得性再生障碍性贫血动物模型的生产方法。

背景技术

再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA)是一种以骨髓造血组织减少、骨髓造血功能下降、全血细胞减少为特征的恶性血液系统疾病。再生障碍性贫血可分为先天性和获得性两大类。先天性AA是一种遗传性疾病，主要由FA基因突变导致。获得性AA的发病机制包括造血干细胞缺陷、造血微环境损伤以及免疫功能异常。先天性再生障碍性贫血模型的建立成本高且技术难度大，一般实验室难以完成。获得性AA动物模型针对不同的发病机制采用不同方法建立，包括化学、物理、免疫介导、物理免疫介导法和物理化学结合法等。如采用化学试剂的造模方法，可能存在外周血项指标无统计学意义，维持时间短，一定时间内小鼠可自行修复，不符合获得性再障的临床诊断指标等缺点。物理射线、病毒感染、淋巴细胞输注等造模方法虽然可以成功制作符合AA病理特点的模型，但是存在着实验成本高、操作复杂、模型小鼠死亡率高、小鼠生存期短，不能满足实验药物疗效观察的等弊端。化学试剂联合物理射线法，特别要考虑小鼠射线照射的剂量，把控化学药物的计量，且操作复杂，造模成本较高，且改造模方法可造成造血干细胞或造血微环境损伤。

发明内容

本发明提供了一种获得性再生障碍性贫血模型小鼠的生产方法，包括对小鼠每日腹腔注射一次环磷酰胺和环孢霉素，所述环磷酰胺的用量为50mg/kg/d，所述环孢霉素的用量为5mg/kg/d，所述环磷酰胺和环孢霉素的注射间隔时间为3～5分钟，连续注射14天。

在一优选例中，所述环磷酰胺和环孢霉素的注射间隔时间为4分钟。

本发明采用腹腔注射环磷酰胺和环孢霉素制备获得性AA小鼠模型，造模药物易获取，造模方法操作简单，可替代物理射线、病毒感染等造模方法。经验证，当环磷酰胺联合环孢霉素腹腔连续注射14天后，小鼠外周血项变化、骨髓病理改变、脾脏免疫变化均达到获得性再生障碍性贫血的诊断标准，且该造模方法只需腹腔注射、操作简便、成功率高、维持时间较长，实验动物死亡率低，模型稳定持久，可作为获得性再生障碍性贫血发病机制及治疗研究的小鼠模型。

本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述，本发明的特点、目的和优势将更为明显。

附图说明

图1为实施例各组骨髓细胞形态a.对照组b.模型组

图2为实施例各组骨髓组织病理学检查a.对照组b.模型组

图3为各组小鼠脾脏组织病理学观察a.对照组b.模型组

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中所使用的试剂和原料均可通过商业途径购买获得。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本专利说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

实施例

实验动物及材料