[发明专利]提高葡萄糖氧化酶的酸稳定性的方法及突变体Q241E/R499E、基因和应用有效
| 申请号： | 202111461303.X | 申请日： | 2021-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN113862233B | 公开（公告）日： | 2022-03-25 |
| 发明（设计）人： | 涂涛;黄火清;闫亚茹;姚斌;罗会颖;张伟;王苑;柏映国;苏小运;王亚茹;张杰;秦星;王晓璐;张红莲;于会民 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 尹超群 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 提高 葡萄糖 氧化酶 稳定性 方法 突变体 q241e r499e 基因 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种提高酸稳定性的葡萄糖氧化酶突变体，其特征在于，将氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示的葡萄糖氧化酶突变体GODM10进行如下突变而得，
第241位和第499位氨基酸由谷氨酰胺和精氨酸突变为谷氨酸得到突变体Q241E/R499E。
2.一种提高葡萄糖氧化酶的酸稳定性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的葡萄糖氧化酶突变体GODM10进行以下突变，
第241位和第499位氨基酸由谷氨酰胺和精氨酸突变为谷氨酸。
3.葡萄糖氧化酶突变体基因，其特征在于，编码权利要求1所述的提高酸稳定性的葡萄糖氧化酶突变体。
4.根据权利要求3所述的葡萄糖氧化酶突变体基因，其特征在于，所述葡萄糖氧化酶突变体基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示。
5.制备酸稳定性提高的葡萄糖氧化酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)用包含编码权利要求1所述的提高酸稳定性的葡萄糖氧化酶突变体的基因的重组载体转化宿主细胞，得重组菌株；
(2)培养重组菌株，诱导表达葡萄糖氧化酶；
(3)回收并纯化所表达的葡萄糖氧化酶。
6.权利要求1所述的提高酸稳定性的葡萄糖氧化酶突变体作为饲料添加剂的应用。
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