[发明专利]通过Cas9-crRNA复合物的RNA指导的DNA裂解在审
| 申请号： | 202111462778.0 | 申请日： | 2013-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN114410625A | 公开（公告）日： | 2022-04-29 |
| 发明（设计）人： | V·希克斯尼斯;G·加休那斯;T·卡维利斯;A·鲁比斯;L·扎里奥斯奇尼;M·格勒姆扎特;A·史密斯 | 申请（专利权）人： | 维尔纽斯大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N9/22;C12N15/10;C12N15/90;C12Q1/6811 |
| 代理公司： | 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 | 代理人： | 郑天松 |
| 地址： | 立陶宛*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 通过 cas9 crrna 复合物 rna 指导 dna 裂解 | ||
1.用于对靶标DNA分子进行位点特异性修饰的方法，所述方法包括在合适的条件下将靶标DNA分子和RNA导向的DNA核酸内切酶相接触，所述RNA导向的DNA核酸内切酶含有至少一个RNA序列以及RuvC活性位点基序和HNH活性位点基序中的至少一个；
以使得靶标DNA分子在某个区域受到修饰，所述区域是由RNA序列与靶标DNA分子的互补结合所确定的。
2.权利要求1的方法，其中位点特异性修饰在体内或在体外发生。
3.权利要求1的方法，其中靶标DNA是双链或单链的。
4.蛋白质-RNA复合物，其包含
a)与SEQ ID NO:1具有至少80％同一性的多肽，
b)第一多核糖核苷酸crRNA，其包含3'区域和5'区域，其中3'区域包含CRISPR基因座中存在的至少22个核苷酸的重复序列，而5'区域包含CRISPR基因座中重复序列下游紧跟的至少20个核苷酸的间隔子序列，以及
c)第二多核糖核苷酸tracrRNA，其包含5'和3'区域，其中5'区域的至少一部分与crRNA的3'区域互补。
5.权利要求4的复合物，其中tracrRNA的5'区域为至少22个核苷酸，并与crRNA的22个核苷酸的3'区域互补。
6.权利要求4的复合物，其分离自嗜热链球菌。
7.权利要求4的复合物，其分离自遗传修饰的微生物。
8.权利要求4的复合物，其中多肽分离自遗传修饰的大肠埃希式杆菌。
9.权利要求4的复合物，其中多肽是由选自重组DNA技术或化学合成的方法产生的。
10.权利要求4的复合物，其中多肽或其片段是以融合多肽的形式表达的，其包含至少一种其他的氨基酸序列。
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