[发明专利]一种干细胞移植的方法

说明书

本发明提供了一种干细胞移植的方法，它是经门静脉进行干细胞移植。本发明通过研究找到一种合适的干细胞门静脉移植方法。该移植方法由本领域常规技术构成，不需要使用精密仪器和耗材，也不需要进行复杂的手术操作，操作简便。与现有技术相比，该移植方法最大程度地减少了对实验大鼠的损伤，更好的减弱实验操作对研究对象及结果的影响，具有优良的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种干细胞移植的方法。

背景技术

外周静脉，因其操作简单、出血量少、对试验动物影响小等优点，是目前国内外移植干细胞最常用的途径。但干细胞从外周血管进入体内，经过全身循环和免疫损伤后进入肝脏定向分化的细胞量明显减少，且肺部的“首过效应”可能影响干细胞的形态和功能。

而门静脉途径可减少干细胞在肺部蓄积及在外周循环的消耗。门静脉供血占75％，经门静脉途径移植的干细胞，循门脉系统定植在肝内相对更均匀，更接近于正常肝索的分布方式，而且门脉血流较慢，移植细胞于肝内停留相对容易，同时门脉血管径相对较粗大，细胞移植堵塞血管的可能性会很低。

但是开腹门静脉操作过程中的麻醉、出血等可导致实验动物萎靡甚至死亡，对后续的实验动物操作影响较大。因此探索改良的干细胞门静脉移植方法，减少非目的因素对实验对象及结果的影响，有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种干细胞移植的方法，它是经门静脉进行干细胞移植。

进一步地，所述干细胞移植时，干细胞个数为3×10^{^6}～9×10^{^6}。

进一步地，所述干细胞个数为3×10^{^6}。

进一步地，所述方法是经门静脉注射干细胞悬液进行干细胞移植；所述干细胞悬液的体积为200μL～800μL。

进一步地，所述干细胞悬液的体积为400μL。

进一步地，所述干细胞悬液为含干细胞的生理盐水。

进一步地，所述干细胞为间充质干细胞。

进一步地，所述注射干细胞悬液时使用的注射器为1mL注射器或胰岛素针。

进一步地，所述注射干细胞悬液时使用的注射器为胰岛素针。

进一步地，所述干细胞移植的实验动物为大鼠；

优选地，所述大鼠为SD大鼠。

本发明干细胞移植的方法包括如下步骤：

(1)将实验动物麻醉后切开腹部，找到肝门部门静脉；

(2)使用注射器从门静脉中段进针，进入约1cm；

(3)注入干细胞悬液后止血、缝合即可。

本发明中，经门静脉干细胞移植是本领域常用方法，本领域技术人员都可以实施。只是现有的门静脉移植操作过程中，使用的注射器、注射体积及注射细胞量各不相同，对试验大鼠有不同程度的损伤(出血量约0.5mL～死亡)。出血量多的大鼠，虽未死亡，但对后续实验造模及评估治疗效果均有影响。比如在急性肝衰竭造模中，出血量多的大鼠，精神萎靡，抵抗力差，造模后肝损伤程度可能更重，死亡更快。因此，需尽可能的减少实验操作对实验对象的影响，以保障实验造模的准确性及结果的可靠性。

本发明通过研究找到一种合适的干细胞门静脉移植方法。该移植方法由本领域常规技术构成，不需要使用精密仪器和耗材，也不需要进行复杂的手术操作，操作简便。与现有技术相比，该移植方法最大程度地减少了对实验大鼠的损伤，更好的减弱实验操作对研究对象及结果的影响，具有优良的应用前景。