[发明专利]一株四环素类抗生素降解菌、方法及应用

权利要求书

1.一株四环素类抗生素降解菌，其特征在于：所述菌株的名称为：Serratiamarcescens sp.AEPI 0-0，分类名称为：粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)，保藏编号为：CGMCC No.23626，保藏日期：2021年10月19日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.根据权利要求1所述的四环素类抗生素降解菌，其特征在于：所述降解菌菌株通过以下步骤得到：

(1)四环素类抗生素耐受菌的富集、驯化：用含有初始浓度为20mg/L盐酸四环素筛选培养基从长期施用有机肥的设施菜地土壤样品的悬浮液中筛选菌种，并以盐酸四环素浓度依次是20mg/L、50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L、400mg/L的筛选培养基进行转接，富集培养驯化获得耐受菌株；

(2)四环素类抗生素降解菌的分离和纯化：将驯化获得的耐受菌株制成耐受菌培养液，用无菌水分别稀释至10^-6、10^-7和10^-8的稀释液，然后分别采用传统的平板涂布法和平板划线法进行菌株的分离与纯化获得单一菌株；

(3)潜在降解菌的筛选：将分离纯化获得的单一菌株接种到含四环素类抗生素的培养基中进行降解实验筛选，获得具有降解培养基中四环素类抗生素能力的菌株，经16S rDNA鉴定为粘质沙雷氏菌，即Serratia marcescens sp.AEPI 0-0。

3.如权利要求1或2所述的四环素类抗生素降解菌在四环素类抗生素降解方面中的应用。

4.如权利要求1或2所述的四环素类抗生素降解菌在制备降解四环素类抗生素菌剂方面中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述四环素类抗生素为四环素。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述四环素类抗生素为盐酸四环素。

7.利用如权利要求1或2所述的四环素类抗生素降解菌去除抗生素的方法，其特征在于：步骤如下：

将四环素类抗生素降解菌进行活化，将保种的粘质沙雷氏菌接种于含有0-5g/L蔗糖、10-30g/L酵母粉及5-10g/L NaCl的培养基中，并于25-35℃的恒温摇床里，150-250r培养24h获得种子液，将种子液接种至含盐酸四环素的抗生素培养基中进行培养，其pH为6.0～10.0，培养温度为25～37℃，可实现抗生素的快速降解去除。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述四环素类抗生素降解菌能够对药物浓度为400mg/L以下的四环素类抗生素进行降解。

9.如权利要求1或2所述的四环素类抗生素降解菌在作为降解四环素类抗生素菌剂方面中的应用。

10.利用如权利要求1或2所述的四环素类抗生素降解菌制备四环素类抗生素菌剂的方法，其特征在于：步骤如下：

将四环素类抗生素降解菌接种于液体培养基中，该液体培养基为含有0-5g/L蔗糖、10-30g/L酵母粉及5-10g/L NaCl的培养基，25℃-30℃条件下，180r摇床中培养12-24h后收集培养液，即得菌剂。