[发明专利]特异性结合环丙沙星的核酸适配体及其用途

说明书

本发明公开了一种特异性结合环丙沙星的核酸适配体及其用途。所述特异性结合环丙沙星的核酸适配体具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，或者与SEQ ID NO：1的全长序列60％以上相同并且能够特异性结合环丙沙星的序列，或者，由SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列衍生的能够特异性结合环丙沙星的核苷酸序列。本发明还公开了一类核酸适配体的缀合物和核酸适配体的衍生物。本发明所提供的核酸适配体、其缀合物及其衍生物能够特异性结合环丙沙星，该核酸适配体具有高度特异性，且具有分子量小、化学性质稳定、易于保存和标记等优点，可以用于环丙沙星的检测。

技术领域

本发明涉及一种核酸适配体，具体涉及一种可用于特异性结合环丙沙星(Ciprofloxacin)的核酸适配体及其用途，属于生物技术领域。

背景技术

环丙沙星别名环丙氟哌酸、适普灵等，外文名：Ciprofloxacin、CPFX、CIPROBAY等。是人工合成的第三代喹诺酮类抗菌药物，是一种新型广谱抗菌药，杀菌力强而迅速。对包括绿脓杆菌、肠道细菌及金黄色葡萄球菌在内的革兰阳性和阴性菌均有杀菌作用。临床多用其盐酸盐，用于呼吸道感染、泌尿道感染、肠道感染、胆道各系统感染、腹腔内感染、妇科疾病感染、骨关节感染及全身严重感染的治疗。

抗生素对细菌感染性疾病的治疗至关重要，但是当过分使用，释放到环境中时，它们可能会影响整个生态系统的平衡并导致耐药菌的产生，从而对人类健康产生重大影响。近年来，由于抗生素的不规范使用，尤其是在动物护理领域的使用不当和预防性使用，抗生素耐药菌的产生和相应的污染已成为全球范围的一个严重问题。环丙沙星属于抗生素的一种，也存在这一问题。目前环丙沙星的检测方法主要是依赖气相色谱-质谱法，液相色谱-串联质谱法，高效液相色谱等方法，色谱法检测灵敏度较高，检测结果准确，但是需要昂贵的仪器设备，对检测材料的要求很高，需要提纯处理，并且耗时，需要专业的技术人员，无法实现快速便捷的检测。因此，越来越需要开发用于快速评估抗生素及其残留物的稳定、简便、灵敏和低成本的方法。而生物传感器的成本低，专一性好，准确性高，只对特定的底物起反应，因此一般不需要进行样品的预处理，干扰少，分析速度快，操作简单，容易实现自动化分析，因此可以很好的避免现有检测手段的缺陷。其中，基于核酸适配体的生物传感器(apta-sensors)因其良好的选择性，特异性和灵敏度而备受关注。

核酸适配体(aptamer)是指通过指数富集的配基系统进化技术(SELEX)筛选分离得到的DNA或者RNA分子，它可以与靶标如蛋白质、金属离子、小分子、多肽甚至整个细胞高亲和力和特异性的结合，因此在生化分析，环境监测，基础医学，新药合成等方面展示广阔的前景。核酸适配体与抗体相比分子量小，稳定性更好，易改造修饰，无免疫原性，制作周期短，可以通过人工合成，免去了动物免疫、饲养、蛋白提取和纯化等一系列流程，因此核酸适配体是一种非常理想的分子探针。

基于SELEX的方法，筛选出结合特定小分子的核酸适配体，并将该核酸适配体用于小分子的检测，目前也被广泛研究。针对于环丙沙星的核酸适配体目前报道的还很少，因此，本领域对针对环丙沙星有高结合亲和力的核酸适配体存在需求。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明要解决的问题是提供一种具有高度特异性、分子量小、化学性质稳定、易于保存和标记的能够结合环丙沙星的核酸适配体及其衍生物，还相应提供所述核酸适配体的用途。

为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：

本发明实施例提供了一种特异性结合环丙沙星的核酸适配体，它具有如SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列，或者与SEQ ID NO：1的全长序列60％以上相同并且能够特异性结合环丙沙星的序列，或者，由SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列衍生的能够特异性结合环丙沙星的核苷酸序列。

进一步地，所述核酸适配体包含能够与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列杂交的核苷酸序列。