[发明专利]一种生物素三肽-1的液相合成方法

说明书

本发明公开了一种生物素三肽‑1的液相合成方法，涉及多肽合成技术领域，包括：由功能化离子液体作为载体，通过缩合反应键合Boc‑Lys‑OH，再通过脱水缩合与Trt‑His‑OH连接，之后再碱液环境下切割除去功能化离子液体得到His(Trt)‑Lys(Boc)‑OH；然后与生物素‑N‑羟基琥珀酰亚胺酯通过化学反应键连甘氨酸得到Biotin‑Gly‑OH通过脱水缩合反应、再脱保护得到生物素三肽‑1。该液相合成方法制得的生物素三肽‑1的纯度和收率均明显增加；且中间产物分离提纯简单，成本降低，污染减少，可扩大化生产。

技术领域

本发明属于多肽合成技术领域，具体涉及一种生物素三肽-1的液相合成方法。

背景技术

现有技术，生物素三肽-1是采用固相合成方法，主要存在问题是固相载体上中间体杂肽无法分离，最终通过制备液相来纯化，放大会导致产品更加杂不易纯化，且存在成本高、对环境的污染大，单批次生产量小的问题。

离子液体作为近年来新兴的一种绿色溶剂和催化剂，在许多种重要的有机合成反应中体现出了明显的优势：反应的选择性、速度和收率得到了显著的提高，反应后处理方便，离子液体可回收使用等。以功能化的离子液体为载体的液相平行合成法综合了液相合成的优点和固相合成的优点，因而在小分子液相平行合成方面的优势越来越明显。离子液体被作为载体负载有机单元反应以及小分子化合物的合成，并建立了合成杂环化合物、多肽、寡糖等化合物的方法；但采用该方法制备生物素三肽-1的方法却几乎未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生物素三肽-1的液相合成方法，该液相合成方法制得的生物素三肽-1的纯度和收率均明显增加；且中间产物分离提纯简单，成本降低，污染减少，可扩大化生产。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种生物素三肽-1的液相合成方法，包括：

His(Trt)-Lys(Boc)-OH的制备：

-由功能化离子液体作为载体，通过缩合反应键合Boc-Lys-OH得到离子载体A；

-取离子载体A通过脱水缩合与Trt-His-OH连接得到离子载体B；

-取离子载体B在碱液环境下切割除去功能化离子液体得到His(Trt)-Lys(Boc)-OH；

Biotin-Gly-OH的制备：

-由生物素-N-羟基琥珀酰亚胺酯通过化学反应键连甘氨酸得到Biotin-Gly-OH；

生物素三肽-1的制备：

-由His(Trt)-Lys(Boc)-OH与Biotin-Gly-OH通过脱水缩合反应、再脱保护得到生物素三肽-1；

其中，所述功能化离子液体结构中至少包含羟基活性基团；上述功能化离子液体原料组成至少包括2-氯-6,7-二甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮或4-氯-1-丁醇。本发明建立了一种以功能化离子液体为载体，温和条件下用碱性溶液进行切割反应，液相合成生物素三肽-1的方法。其中，采用功能化离子液体应用于液相合成，其单位负载量高，中间产物分离纯化简便；反应过程用到的有机挥发性溶剂、过量试剂、催化剂等的用量减少，降低了对环境的污染；且合成的目标产物产率与纯度高，无需进一步的色谱纯化。本发明加入2-氯-6,7-二甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮制备得到的功能化离子液体，作为可溶性载体用于生物素三肽-1的液相合成中，能够进一步提高生物素三肽-1产品的纯度，且收率也有明显的增加。

在一些实施方式中，功能化离子液体原料组成还包括1-甲基咪唑。

进一步地，一种生物素三肽-1的液相合成方法，步骤具体包括：

His(Trt)-Lys(Boc)-OH的制备：