[发明专利]一株分泌山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用

说明书

本发明涉及细胞工程技术领域。本发明提供了一株分泌山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用，所述杂交瘤细胞的保藏名称为杂交瘤细胞系6E4，保藏日期：2021年10月27日，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO:C202181。本发明的单克隆抗体特异性好，抗体效价高达1:819200，纯化方法简单，纯度高，可用于制备山羊地方性鼻内肿瘤病毒ELISA等快速检测试剂盒，适用于山羊地方性鼻内肿瘤病毒病的临床快速检测，对山羊地方性鼻内肿瘤病毒病的净化具有重要意义。

技术领域

本发明涉及细胞工程技术领域，尤其涉及一株分泌山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用。

背景技术

山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)属于反转录病毒科正反转录病毒亚科β反转录病毒属B/D型反转录病毒，病毒粒子呈球形，病毒的基因组是单股正链线性RNA，长约7.5kb。ENTV-2是山羊(Capra hircus)地方性鼻内肿瘤(enzootic nasal tumor，ENT)的病原。山羊地方性鼻内肿瘤是一种患病羊以流鼻液、面部肿胀、体重减轻，剖检可见鼻腔内一侧或两侧类似菜花状肿瘤为特征的慢性接触性传染病，该病发病率为1％～40％，病死率为100％，该病潜伏期长达数月甚至数年，该病在亚洲、欧洲都有发生，给世界养羊业造成较严重的经济损失。我国于1995年首次报道了内蒙古山羊发生了该病，随后，湖南、四川和陕西等地均有该病发生的报道。

目前，ENTV-2尚无体外培养系统，限制了该病原的研究，目前国内外均无能预防该病的疫苗，给该病的防治带来巨大困难。目前唯一的方法就是通过检测病原，淘汰带毒羊群实现该病的净化。然而目前的检测方法仅限于PCR方法，未有免疫学检测方法。而获得能稳定分泌山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)的单克隆抗体的杂交瘤细胞株对建立免疫学检测方法及其它快速检测方法都至关重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一株分泌山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用，为建立快速检测山羊地方性鼻内肿瘤病毒的免疫学方法奠定基础。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一株分泌山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞，所述杂交瘤细胞的保藏名称为杂交瘤细胞系6E4，保藏日期：2021年10月27日，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO:C202181。

本发明还提供了所述杂交瘤细胞分泌的山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体。

本发明还提供了所述的山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体在制备山羊地方性鼻内肿瘤病毒检测试剂盒中的应用。

本发明还提供了一种山羊地方性鼻内肿瘤病毒感染检测试剂盒，所述试剂盒中包含山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体。

作为优选，所述试剂盒中还包括包被缓冲液、封闭液、稀释液、PBST洗涤液、过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)、TMB显色液、2％H₂SO₄。

本发明提供了一株分泌山羊地方性鼻内肿瘤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用，所述杂交瘤细胞的保藏名称为杂交瘤细胞系6E4，保藏日期：2021年10月27日，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO:C202181。本发明的单克隆抗体特异性好，抗体效价高达1:819200，纯化方法简单，纯度高，可用于制备山羊地方性鼻内肿瘤病毒ELISA等快速检测试剂盒，适用于山羊地方性鼻内肿瘤病毒病的临床快速检测。

附图说明

图1为单克隆抗体亚类鉴定结果；

图2为纯化的单克隆抗体SDS-PAGE分析结果。

保藏说明