[发明专利]一种检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器及制备方法

说明书

一种检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器，包括金电极表面滴加有rGO‑PEI‑Ag‑Nf复合溶液的纳米复合材料，在纳米复合材料上固定葡萄球菌A蛋白,然后滴加抗氨苯胂酸单克隆抗体，最外层为牛血清白蛋白，所述的rGO‑PEI‑Ag‑Nf复合溶液包括还原氧化石墨烯、聚乙烯亚胺和银纳米粒子和全氟磺酸，采用以上结构后，本发明具有如下优点：本发明提供了一种用于检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器，具有检出限低，线性检测范围宽，灵敏度高，操作简便等优势，本发明将rGO‑PEI‑Ag‑Nf纳米复合材料作为电化学免疫传感器的基底材料，银纳米粒子不仅具有优良的导电性能，还能作为检测电化学信号的氧化还原探针。

技术领域

本发明涉及金属纳米材料、免疫反应和生物传感检测技术领域，具体是指一种检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器及制备方法。

背景技术

有机砷在20世纪50年代作为一种饲料添加剂，不仅可以促进家禽体重增加，增强肉类色素沉着，还可以抑制肠道有害细菌的生长和繁殖。其中，氨苯胂酸(ASA)和洛克沙胂(ROX)被广泛使用在动物生产中，作为控制我国家禽疾病的食品添加剂。然而，随着国家食品安全检测技术的快速发展，研究人员发现ASA添加剂的使用水平高于推荐水平，可能导致动物机体四肢瘫痪，共济失调，肌肉震颤和失明等毒性作用。残留在动物组织中的ASA可通过食物链进入人体，引起毒性和致畸作用。2020年，中国规定猪肉和猪肝中ASA的最大残留限量为500μg/kg。因此，需要制定有效的检测方法，以避免此类添加剂的滥用。

目前，有机砷残留的主要检测方法是HPLC和ELISA。然而，基于仪器的色谱检测方法需要昂贵的设备，复杂的样品制备，大量的有机试剂和专业的操作人员。ELISA具有灵敏度高，通量高的优点，但它也存在耗时且无法提供快速现场检测的缺点。因此，开发一种低成本，简单，灵敏和选择性的检测方法至关重要。电化学免疫传感器具有能耗低，设备简单，易于小型化等优点而受到越来越多的关注。它已被广泛应用在许多领域，如医疗诊断，环境监测，食品安全监测等。因此，这种分析方法将成为一种非常有前途的检测技术。本实验基于所制备的具有高亲和力的氨苯胂酸(ASA)单克隆抗体，制备了一种无标记的电化学免疫传感器，用于猪肉和猪肝中ASA的灵敏检测。

发明内容

本发明要解决上述技术问题，提供一种检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器及制备方法，以解决上述现有技术存在的问题，本发明所设计、构建的传感器可实现定量、灵敏检测，具有较宽的检测范围和较低的检测限，并具有良好的重现性和稳定性。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：

一种检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器，包括金电极表面滴加有rGO-PEI-Ag-Nf复合溶液的纳米复合材料，在纳米复合材料上固定葡萄球菌A蛋白,然后滴加抗氨苯胂酸单克隆抗体，最外层为牛血清白蛋白，所述的rGO-PEI-Ag-Nf复合溶液包括还原氧化石墨烯、聚乙烯亚胺和银纳米粒子和全氟磺酸。

采用以上结构后，本发明具有如下优点：

1.本发明提供了一种用于检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器，具有检出限低，线性检测范围宽，灵敏度高，操作简便等优势，对于动物源性食品中氨苯胂酸的高灵敏度和高选择性定量检测有一定的实际应用前景。

2.本发明将rGO-PEI-Ag-Nf纳米复合材料作为电化学免疫传感器的基底材料，银纳米粒子不仅具有优良的导电性能，还能作为检测电化学信号的氧化还原探针，不需要额外加入氧化还原探针，从而制备了一种免标记的电化学免疫传感器，简化了电化学免疫传感器的制备过程。

3.本发明将rGO-PEI-Ag-Nf纳米复合材料作为电化学免疫传感器的基底材料，PEI不仅可以提高溶液的稳定性，延长材料的使用期限，而且可以作为GO的还原剂，生成具有高导电性的rGO，rGO和AgNPs的双重导电性，提高了传感器的灵敏性。

一种检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：