[发明专利]一种经半理性改造提升活性的腈水解酶突变体在审
| 申请号： | 202111476802.6 | 申请日： | 2021-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN114214308A | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;韩来闯;刘欣悦;崔文璟;程中一;刘中美;周丽;郭军玲 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/78 | 分类号： | C12N9/78;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/12;C12P7/40;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 理性 改造 提升 活性 水解 突变体 | ||
1.一种腈水解酶突变体，其特征在于，所述突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1的腈水解酶的第170位、第197位、第198位中的两个以上的位点进行突变得到的。
2.根据权利要求1所述的腈水解酶突变体，其特征在于，所述突变体为一下(a)～(c)任一：
(a)将氨基酸序列SEQ ID NO.1的第170位的蛋氨酸突变成甘氨酸，将第197位的蛋氨酸突变成苯丙氨酸，将第198位的缬氨酸突变成异亮氨酸；
(b)将氨基酸序列SEQ ID NO.1的第170位的蛋氨酸突变成甘氨酸，将第198位的缬氨酸突变成天冬氨酸；
(c)将氨基酸序列SEQ ID NO.1的第170位的蛋氨酸突变成甘氨酸，将第197位的蛋氨酸突变成苯丙氨酸，将第198位的缬氨酸突变成亮氨酸。
3.一种编码权利要求1或2所述腈水解酶突变体的基因。
4.一种携带权利要求3所述基因的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体以pET-24a(+)为表达载体。
6.一种携带权利要求3所述基因，或权利要求4或5所述重组载体的微生物细胞。
7.根据权利要求5所述的微生物细胞，其特征在于，所述微生物细胞以细菌或真菌为表达宿主。
8.一种烟酸的制备方法，其特征在于，所述方法为，将权利要求1或2所述腈水解酶突变体，或权利要求6或7所述微生物细胞添加至含有烟腈的培养基中，进行反应制备得到的。
9.权利要求1或2所述腈水解酶突变体，或权利要求3基因，或权利要求4或5所述重组载体，或权利要求6或7所述微生物细胞在制备含有羧酸类物质中的应用。
10.权利要求1或2所述腈水解酶突变体，或权利要求3基因，或权利要求4或5所述重组载体，或权利要求6或7所述在制备烟酸、2-吡啶甲酸、苯甲酸或含有烟酸、2-吡啶甲酸、苯甲酸的产品中的应用。
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