[发明专利]一种显性孔雀石绿半抗原的合成方法及其半抗原的应用

权利要求书

1.一种显性孔雀石绿半抗原的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：以4-甲酰基苯硼酸和丙烯酸为原料合成化合物A；

A

S2：化合物A在氯化锌存在下与N，N-二甲基苯胺反应得到化合物B；

B

S3：化合物B通过四氯对苯醌氧化得到显性孔雀石绿半抗原；

。

2.如权利要求1所述的一种显性孔雀石绿半抗原的合成方法，其特征在于，步骤S1具体为：将4-甲酰基苯硼酸、丙烯酸和二聚合羟基（1,5-环辛二烯）铑（I）溶于纯水中，体系置换为Ar保护，75℃搅拌反应16-24h得到化合物A。

3.如权利要求2所述的一种显性孔雀石绿半抗原的合成方法，其特征在于，步骤S1中的4-甲酰基苯硼酸、丙烯酸和二聚合羟基（1,5-环辛二烯）铑（I）的摩尔比为1：0.4-1：0.01。

4.如权利要求1所述的一种显性孔雀石绿半抗原的合成方法，其特征在于，步骤S2具体为：化合物A、氯化锌和N，N-二甲基苯胺按照摩尔比1：3-3.5：3-3.5在无水乙醇中加热至90℃反应24h得化合物B。

5.如权利要求1所述的一种显性孔雀石绿半抗原的合成方法，其特征在于，步骤S3具体为：将化合物B、四氯对苯醌和冰乙酸按照摩尔比1：1.2：13溶于氯仿中，进行氧化反应制得显性孔雀石绿半抗原。

6.一种采用权利要求1-5任一所述合成方法得到的显性孔雀石绿半抗原制备显性孔雀石绿人工抗原的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：将显性孔雀石绿半抗原通过活化处理，得到显性孔雀石绿半抗原活性酯溶液；

步骤二：将显性孔雀石绿半抗原活性酯溶液与载体蛋白偶联制得显性孔雀石绿人工抗原，所述的载体蛋白为牛血清白蛋白、钥孔血蓝蛋白、血蓝蛋白、鸡卵血清白蛋白、人血清白蛋白中的一种。

7.如权利要求6所述的一种采用显性孔雀石绿半抗原制备显性孔雀石绿人工抗原的方法，其特征在于，步骤一中的活化处理为：将显性孔雀石绿半抗原用N,N-二甲基甲酰胺溶解，显性孔雀石绿半抗原、NHS和EDC盐酸盐的摩尔比1：1-2：1-2，室温反应16-24h，得到显性孔雀石绿半抗原活性酯溶液。

8.如权利要求6所述的一种采用显性孔雀石绿半抗原制备显性孔雀石绿人工抗原的方法，其特征在于，步骤一中的活化处理为：将显性孔雀石绿半抗原用N,N-二甲基甲酰胺溶解，显性孔雀石绿半抗原、正丁胺和氯甲酸异丁酯的摩尔比为1：1.2：1.2，反应1h，得到显性孔雀石绿半抗原活性酯溶液。

9.如权利要求6-8任一所述的方法合成的显性孔雀石绿人工抗原，其特征在于，所述显性孔雀石绿人工抗原的分子结构式为：

其中：为载体蛋白，所述的载体蛋白为牛血清白蛋白、钥孔血蓝蛋白、血蓝蛋白、鸡卵血清白蛋白、人血清白蛋白中的一种。

10.如权利要求9所述的显性孔雀石绿人工抗原的非疾病诊断和治疗方法的应用，其特征在于，用于检测显性孔雀石绿残留。