[发明专利]一种抗生素菌渣裂解液回用青霉素发酵的方法在审
申请号: | 202111480415.X | 申请日: | 2021-12-06 |
公开(公告)号: | CN114292755A | 公开(公告)日: | 2022-04-08 |
发明(设计)人: | 王路路;韩贺东;彭涛;陈英新;袁晓明;葛峰;杨帆;白雪峰 | 申请(专利权)人: | 内蒙古常盛制药有限公司;石药集团内蒙古中诺药业有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P37/00;C12R1/80 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 孙光远 |
地址: | 010206 内蒙古*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抗生素 裂解 液回用 青霉素 发酵 方法 | ||
1.一种抗生素菌渣裂解液回用青霉素发酵的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)菌渣预处理:将抗生素菌渣干燥后冷却,得干菌渣,经粉碎过筛,得干菌渣颗粒;
(2)菌渣的裂解:称取干菌渣颗粒,加水制成菌渣浆液,加热,搅拌,降温后调pH,加入蛋白酶进行酶裂解,得菌渣裂解液;
(3)裂解液灭活:菌渣裂解液经灭活,保存备用;
(4)裂解液回用发酵:将菌渣裂解液加入青霉菌摇瓶培养基,灭菌,降温后接入种子液,摇床培养。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述的抗生素菌渣为β-内酰胺类抗生素菌渣。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述β-内酰胺类抗生素菌渣:青霉素菌渣或头孢菌素C菌渣。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述干燥:鼓风干燥方式,温度50~100℃,维持16~24h;所述冷却:自然冷却,冷却至20~25℃;所述干菌渣颗粒的粒径0.5~1mm。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述加水:称取干菌渣颗粒15~20倍重量水;所述加热至60~100℃,搅拌30~50min,降温至30~60℃;所述调pH:加25~35%NaOH至pH7.0~9.0;所述酶裂解:保持酶裂解温度30~60℃,3~5%NaOH控制pH7.0~9.0,持续酶裂解4~8h,搅拌转速为180~220r/min。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的蛋白酶:组织蛋白酶或木瓜蛋白酶;以菌渣颗粒质量计,所述的组织蛋白酶用量为1000~1500U/g,所述的木瓜蛋白酶用量为800~1000U/g。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述灭活:菌渣裂解液密封高压蒸汽灭菌,灭活温度118~121℃,压力0.15~0.20MPa,灭活时间20~30min;操作完毕自然冷却至20~25℃;所述保存:灭活后的菌渣裂解液于2~8℃保存。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中所述菌渣裂解液加入青霉菌摇瓶培养基后的成分:菌渣裂解液13.3~30.0g/L、玉米浆15~22.5g/L、乳糖130.0~135.0g/L、硫酸钠1.0~2.0g/L、碳酸钙10.0~11.0g/L、磷酸二氢钾3.0~5.0g/L、硫酸铵6.0~9.0g/L,25~35%NaOH调pH5.80~5.90;定容至1000mL。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中所述灭菌:121℃灭菌30min;待温度降至25±2℃,接入10~12%种子液;所述摇床的转速160~220rpm,温度25±2℃,培养5~7天。
10.权利要求1~9任一方法在环境保护中的应用。
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