[发明专利]一种血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联方法及试剂盒

权利要求书

1.一种血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联方法，其特征在于：包括以下制备步骤：

S1:采用浓度为5mmol/L的2-(N-吗啉)乙磺酸作为缓冲液，调整缓冲液的pH为6.1～6.4；

S2:用S1制备的缓冲液对磁珠进行清洗多次，并用该缓冲液重悬磁珠；

S3:将EDC和NHS分别溶于DMSO中制得EDC活化剂和NHS活化剂，并将其混匀，得到混合活化剂；

S4:将S3制备的混合活化剂加入到S2处理过的重悬磁珠中，进行活化，之后再通过S1制备的缓冲液进行清洗、重悬经过活化的磁珠，得到活化磁珠缓冲液；

S5:将血清淀粉样蛋白A抗体加入到S4制得的活化磁珠缓冲液内，进行偶联反应；

S6:在S5经过偶联的磁珠内加入封闭剂进行清洗、重悬、封闭，之后用R1稀释液对经过封闭的磁珠进行清洗，并在经过清洗的磁珠内加入R1稀释液进行稀释，制得R1，即完成血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联。

2.根据权利要求1所述的一种血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联方法，其特征在于：S1中的缓冲液pH为6.1。

3.根据权利要求1所述的一种血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联方法，其特征在于：S2中的磁珠为四氧化三铁磁珠。

4.根据权利要求1所述的一种血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联方法，其特征在于：S3中混合活化剂中，EDC活化剂和NHS活化剂的比例为1:1。

5.根据权利要求1所述的一种血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联方法，其特征在于：S6中的封闭剂为牛血清白蛋白和酪蛋白中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的一种血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联方法，其特征在于：S6中R1稀释液的配比如下：0.05～0.2mol/L的Tris-HCl缓冲液，0.01～1g/L的牛血清白蛋白，0.5～2g/L的Triton X-405，5～20g/L的氯化钠，2～20％的蔗糖，0.5～2g/L的叠氮钠。

7.一种试剂盒，包括权利要求1-6任一项所述的血清淀粉样蛋白A抗体与磁珠的偶联方法所制备的R1，其特征在于：还包括R2和R3；

其中R2包括：吖啶酯标记的血清淀粉样蛋白A抗体和R2缓冲液，且吖啶酯标记的血清淀粉样蛋白A抗体与R2缓冲液的体积比为1:400；

其中R2缓冲液的配比如下：Tris-HCl缓冲液0.05～0.2mol/L，牛血清白蛋白0.05～2g/L，吐温20 0.1～2g/L，氯化钠5～20g/L，海藻糖2～20％，叠氮钠0.5～2g/L；

R3的配比如下：0.005～0.02mol/L的Na₂HPO₄-NaH₂PO₄，0.01～1g/L的牛血清白蛋白，0.5～2g/L的Triton X-405，5～20g/L的氯化钠，2～20％的海藻糖，0.5～2g/L的叠氮钠。