[发明专利]一种阿伐那非及其相关杂质的检测方法

说明书

本发明公开了一种阿伐那非及其相关杂质的检测方法，以甲酸铵‑乙腈为流动相，采用UPLC兼容LC‑MS的分析方法对阿伐那非进行分析鉴定，可以有效分离采用特定合成路线合成的阿伐那非及其相关杂质，为阿伐那非原料药的关键工艺参数控制以及质量控制提供了新方法。

技术领域

本发明属于涉及药物分析技术领域，具体为阿伐那非及其相关杂质的检测方法。

背景技术

阿伐那非(Avanafil)，是一种口服速效的高选择性磷酸二酯酶-5(PDE-5)抑制剂，2012年在美国上市，用于治疗治疗男性勃起功能障碍。对于采用全合成方法得到的药物，由于经过多种中间体及使用许多反应试剂，所以在得到所需要的最终活性药物成分(API)时，在API中会夹杂药物杂质。这些杂质可能会对最终产品的有效性和安全性产生重大影响。根据国际协调会议(ICH)推荐的关于原料药中杂质的通用指南，对于最大日剂量等于或小于2g的药物，原料药中任何大于0.10％的杂质都应该被识别和定性。专利CN111208232A公开了一种阿伐那非及其制剂中有关物质的分析方法，该专利中采用高效液相色谱方法进行分析检测，使用辛烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，以磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，可以分离阿伐那非及其9个工艺杂质。专利CN106198766A公开了一种阿伐那非及其制剂的高效液相色谱分析方法，通过使用十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，可以从阿伐那非中检测分离3种已知杂质。现有技术都是通过液相色谱对阿伐那非中的已知杂质进行分离，且未对其杂质的结构进行鉴定，有一定的局限性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种阿伐那非及其相关杂质的检测方法，该方法可以很好地分离特定合成路线合成的阿伐那非及其有关杂质，还可以通过UPLC兼容LC-MS对已知杂质和未知杂质进行鉴定，达到药品质量控制要求。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为:

一种阿伐那非及其相关杂质的检测方法，所述方法为采用C18色谱柱，以10-30mM的甲酸铵水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，0.2-0.5ml/min为流速的UPLC兼容LCMS方法对由以下路线合成的阿伐那非进行分析检测：

优选地，所述流动相A为20mM的甲酸铵水溶液，pH为4.95～5.05。

优选地，所述检测方法中UPLC和LC-MS的流速均为0.3ml/min。

优选地，所述检测方法中UPLC的进样量为1.0μL，柱温为35℃。

优选地，所述检测方法中LC-MS的雾化器气体压力为4.0bar，干燥气流速为8.0L/min，毛细管电压为3.5kV，转移毛细管温度为200℃。

优选地，所述检测方法的UPLC方法的线性梯度方案设置为:T时间/流动相A:B(％):T0/90:10；T1/90:10；T8/20:80；T10 90:10；T11/90:10。

优选地，所述检测方法的LC-MS方法的线性梯度方案设置为:时间(min)/A:B(v/v)：T0/90:10；T1/90:10；T8/20:80；T10/；90:10T11/90:10。

优选地，待测阿伐那非中含有[1-(4-{[(3-氯-4-甲氧基苯基)甲基]氨基}-5-{[(嘧啶-2-基)甲基]氨基甲酰基}嘧啶-2-基)吡咯烷-2-基]甲基4-{[(3-氯-4-甲氧基苯基)甲基]氨基}-2-[2-(羟甲基)吡咯烷-1-基]嘧啶-5-甲酸酯。