[发明专利]一种镉锌硒量子点及其制备方法和应用、ALP检测方法

说明书

本发明提供了一种镉锌硒量子点及其制备方法和应用、ALP检测方法，该量子点的制备方法为：通过将镉前驱体、锌前驱体混合后得到混合液，再将NaHSe加入至混合液中反应得到。该方法制备工艺简单，不涉及任何复杂和严格的条件，制备得到的镉锌硒量子点显示出各种优势，包括高发光效率高，稳定性好，生物相容性好。实验表明抗坏血酸磷酸盐和高锰酸钾都可以通过动态猝灭来猝灭镉锌硒量子点的荧光，ALP催化的AAP水解物抗坏血酸可以与高锰酸钾反应，导致AAP和KMnOsubgt;4/subgt;同时消耗，以及量子点的协同荧光恢复，荧光恢复信号用于ALP活性测定，该方法可以为提高ALP检测灵敏度提供新的研究思路。

技术领域

本发明涉及荧光分析技术领域，特别涉及一种镉锌硒量子点及其制备方法和应用、ALP检测方法。

背景技术

碱性磷酸酶(ALP)是一种重要的水解酶，一般分布于哺乳动物的体液和组织中。它可以通过去磷酸化过程从各种生物分子如核酸和蛋白质中去除磷酸基团。通常，成人血液中的ALP的浓度为40-190U/L，儿童和孕妇可达到500U/L。人血清中ALP活性异常与许多疾病有关，如糖尿病、肝功能障碍、骨病和乳腺癌。此外，ALP是酶联免疫吸附测定中最广泛使用的标记酶之一，因为它具有广泛的底物特异性、良好的稳定性、高催化效率和低成本。因此，开发一种简单、灵敏、可靠的方法来监测ALP活性以进行临床诊断。在检测ALP活性的几种策略中，如比色法、化学发光或电化学发光、电化学、和荧光中，荧光分析被认为是最广泛使用的分析方法，因为它具有高灵敏度的优点，同时操作方便、仪器要求低。

荧光分析以两种主要模式进行：荧光关闭和荧光启动，分别取决于荧光猝灭和恢复。现有技术大多是公开了一种基于ALP响应水解的镉-碲/硫化镉量子点(QDs)的荧光猝灭，制造了用于ALP检测的荧光关闭系统，但荧光关闭系统的准确性和灵敏度有待提高。现有技术公开了一种检测ALP的方法，其中由邻苯二酚和间苯二酚之间的开启荧光反应产生具有强荧光发射的氮芥碱，这是由于ALP催化羟苯基磷酸钠水解产生的。荧光启动方法可以有效地减少环境干扰，提高分析灵敏度。上述两种模式的结合，即荧光启动系统，具有准确度高、干扰小、选择性高的优点。在大多数关闭系统中，探针荧光首先被单一淬灭剂降低，然后通过淬灭剂和分析物之间的反应恢复。

然而，基于单一猝灭剂的信号转导受到猝灭敏感性的限制，因此有必要提供一种新的检测ALP的方法。

发明内容

有鉴于此，本发明提出了一种镉锌硒量子点制备方法及其制备方法和和应用、ALP检测方法，解决或至少部分解决现有技术中存在的技术缺陷。

第一方面，本发明提供了一种镉锌硒量子点制备方法，包括以下步骤：

将镉源和谷胱甘肽加入至水中得到镉前驱体；

将锌源和谷胱甘肽加入至水中得到锌前驱体；

将Se粉和NaBH₄加入至水中制备得到NaHSe溶液；

将镉前驱体、锌前驱体混合后，得到混合液，再将NaHSe溶液加入至混合液中，于90～100℃下反应，即得镉锌硒量子点。

优选的是，所述的镉锌硒量子点制备方法，所述镉源包括氯化镉、硝酸镉、硫酸镉中的至少一种；

和/或，所述锌源包括乙酸锌、硝酸锌、氯化锌、硫酸锌中的至少一种。

优选的是，所述的镉锌硒量子点制备方法，将镉前驱体、锌前驱体混合之前还包括：分别将镉前驱体、锌前驱体pH调节至6～12。

优选的是，所述的镉锌硒量子点制备方法，所述将镉源和谷胱甘肽加入至水中得到镉前驱体的步骤中，镉源、谷胱甘肽、水的质量体积比为(80～90)mg: (145～155)mg:(35～45)mL；