[发明专利]一种芬氟拉明半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种芬氟拉明半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用，本发明制备得到了两种半抗原，半抗原FB和半抗原FN，应用半抗原FB偶联载体蛋白LF得到人工抗原FB‑LF，并进一步制备得到用于检测芬氟拉明的特异性抗体，应用人工抗原FN‑OVA作为包被原，该抗体对芬氟拉明具有良好的灵敏度和特异性，半抑制浓度为10.22ng/mL，最低检测限为0.63ng/mL，定量检测范围为1.76～59.13ng/mL，对芬氟拉明类似物无交叉反应，可特异性检测芬氟拉明；本发明建立了芬氟拉明的免疫分析方法，实现了快速准确检测芬氟拉明的目的。

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，更具体地，涉及一种芬氟拉明半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

背景技术

芬氟拉明(fenfluramine)在治疗剂量下是抑制中枢的，具有镇静作用。它促进神经末梢释放5-羟色胺，抑制5-羟色胺在摄取和激动5-羟色胺受体，兴奋下丘脑饱食中枢，从而引起食欲减退。它还能增加葡萄糖的利用，降低血糖。在大剂量下(右旋)芬氟拉明具有兴奋中枢作用。常见的副作用及其中枢效应有口干、腹泻、昏睡、头痛、眩晕、肠胃功能紊乱、失眠、血压的改变(大多为低血压)、不安、心悸、出汗等。单独且长时间使用芬氟拉明减肥时会出现心脏瓣膜损伤的情况。为此，1997年9月FDA发出声明敦促生产商停止芬氟拉明与右旋的市场销售。随后这两种药物相继退出全球市场。我国也已禁止在减肥类保健品中使用芬氟拉明，但仍允许其作为治疗单纯性肥胖症的处方药使用。

目前，分析芬氟拉明等食欲抑制剂的方法以各种色谱技术为主，包括HPLC(APCL-MS)、LCMS/MS(李荫,等.LC-MS/MS检测减肥保健品中4种违禁药物研究[J].新技术新工艺,2017(01):66-69.)、及GC/MS等。然而，这些方法虽然具有检测效率高、准确度高、抗干扰能力强等特点；但是，检测所需的仪器设备昂贵、成本高、样品前处理繁杂、需专业人士操作，不符合大批量样品现场检测要求。

现有技术公开了一种保健食品中非法添加违禁药物芬氟拉明的快速检测方法，该方法是利用试剂A构造酸性反应环境，然后加入试剂B及试剂C，利用亚硝酸离子在酸性介质中与对硝基苯胺发生重氮化反应，再加入适量的碱性试剂C中和过量的酸，调节适宜的pH环境，然后在该环境中使重氮对硝基苯胺可与目标物质芬氟拉明偶联，生成红色偶氮化合物，根据是否出现红色判断是否非法添加了违禁药物芬氟拉明，该方法利用化学反应结合显色判断是否含有芬氟拉明，不能准确检测芬氟拉明的添加量，且化学反应的试剂也会对环境造成影响，不符合大批量样品现场检测要求。现有技术中也还未见有关于芬氟拉明半抗原、人工抗原、抗体的相关报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术中芬氟拉明检测方法的缺陷和不足，提供一种芬氟拉明半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

本发明的目的在于提供两种芬氟拉明半抗原。

本发明的目的还在于提供芬氟拉明半抗原在制备芬氟拉明人工抗原中的应用。

本发明的目的还在于提供芬氟拉明人工抗原。

本发明的目的还在于提供所述芬氟拉明半抗原和/或人工抗原在制备芬氟拉明人工抗体中的应用。

本发明的目的还在于提供一种芬氟拉明抗体。

本发明的目的还在于提供一种检测芬氟拉明的试剂盒。

本发明的目的还在于提供一种检测芬氟拉明的免疫分析方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

一种芬氟拉明半抗原，为半抗原FB或半抗原FN，所述半抗原FB的结构式如式(I)所示，

所述半抗原FB采用系统命名法命名为：4-((1-(3-(三氟甲基)苯基)丙-2-基)氨基)丁酸；