[发明专利]一种GSH响应型紫杉醇荧光纳米粒子的制备方法

说明书

本发明涉及一种GSH响应型紫杉醇荧光纳米粒子的制备方法，步骤如下：通过酯化反应制备得到由二硫键连接的紫杉醇二聚体药物作为疏水性药物；嵌段共聚物与疏水性药物或荧光染料溶于四氢呋喃中，作为1号流股；去离子水作为2号流股。将1号和2号两个流股同时注入到两通道限域对冲混合器中进行快速混合，收集得到制备的纳米悬浮液，通过调节物料比例和流速调节载药量与纳米颗粒尺寸。本发明将具有GSH响应的紫杉醇二聚体药物与荧光染料在无需化学修饰的条件下直接制备得到载药荧光纳米粒子，克服了复杂的化学修饰过程，通过对制备过程参数的调节，实现对尺寸和释放性能的有效调控。本发明在医学成像和肿瘤治疗方面具有潜在的应用前景和价值。

技术领域

本发明涉及一种GSH响应释放的紫杉醇荧光纳米粒子，具体为通过纳米瞬时沉淀法高载药量响应释放纳米粒子，属于新材料技术领域。

背景技术

近年来，纳米粒子作为载体的纳米药物在肿瘤成像与治疗方面引起了广泛的关注和研究。

紫杉醇作为一种具有良好抗肿瘤活性的天然药物，被应用于临床肿瘤治疗的化疗中。但紫杉醇水溶性很差，在水相环境中难以均匀分散，因此需要将其制成合适的药物剂型。目前用于临床的商用紫杉醇制剂中，为了改善其在水相中的分散效果，需要加入大量助剂，从而降低了紫杉醇药物的负载效率。因此提高紫杉醇的负载量及其纳米制剂的稳定性是目前广泛研究的关键问题之一。

纳米粒子进入体内后是否能被细胞摄取，并将负载药物有效释放出来是载药纳米粒子的另一个重要特性。为了能够有效观察纳米粒子的输送和富集情况，通常需要在药物或纳米载体表面修饰荧光基团，使纳米粒子在激光照射下发出荧光，从而观察到其富集情况；为了使纳米粒子的特定条件下将药物释放出来，通常会在药物或纳米载体表面修饰响应性基团，在肿瘤部位的特定条件刺激下，响应性基团的反应使药物以游离态的形式释放出来。因此对药物或纳米载体的功能化修饰可以将纳米药物应用在成像和治疗等领域。

目前载药纳米粒子的制备方法通常有溶剂挥发法、透析渗析法等，这些方法制备纳米粒子需要较长的制备时间，从而存在载药率低和粒子尺寸分布宽等缺点。针对这些问题，本发明采用一种新的纳米粒子制备方法，将具有GSH响应的紫杉醇二聚体药物与荧光染料在无需化学修饰的条件下直接制备得到载药荧光纳米粒子，克服了复杂的化学修饰过程，并通过对制备过程参数的调节，可实现对尺寸和释放性能的有效调控。该方法操作简单，易于控制，无工业放大效应，在医学成像和肿瘤治疗领域有潜在的应用价值。

发明内容

鉴于以上问题，本发明的目的在于制备具有响应释放性能的稳定高负载量紫杉醇纳米粒子，采用瞬时纳米沉淀法(Flash Nanoprecipitation,FNP)，将制备时间缩短至几秒钟，通过对投料量和流股流速的调节实现对纳米粒子尺寸的调控，无需化学修饰即可将荧光染料分子共同负载至纳米粒子内部。该方法具有操作简单、过程时间短且参数可调控、易于工业放大等优点，在医学示踪成像、药物释放等领域具有潜在的应用价值和工业应用前景。具体技术方案如下：

一种GSH响应型紫杉醇荧光纳米粒子的制备方法，是利用瞬时纳米沉淀法制备GSH响应型紫杉醇二聚体荧光纳米颗粒的方法，包括如下步骤：

预先通过酯化反应获得由二硫键连接的紫杉醇二聚体药物作为疏水性药物。嵌段共聚物与疏水性药物或荧光染料溶于四氢呋喃中，作为1号流股；去离子水作为2号流股。将1号和2号两个流股通过注射泵同时注入到两通道限域对冲混合器中进行快速混合，收集得到制备的纳米悬浮液，通过调节物料比例和流速调节载药量与纳米颗粒尺寸。

进一步的，所述嵌段共聚物为PLGA-b-PEG，PLGA嵌段分子量为10kDa，PEG嵌段分子量为5kDa，总分子量为15kDa。

进一步的，所述嵌段共聚物PLGA-b-PEG配置浓度范围为0-10mg/mL。

进一步的，所述嵌段共聚物PLGA-b-PEG配置浓度为2mg/mL。